[求助]我的细胞是被污染了吗？

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]我的细胞是被污染了吗？

15 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]我的细胞是被污染了吗？

轰轰[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75630
精华 0
积分 235
帖子 209
信誉分 100
可用分 1866
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态离线

发表于 2012-7-12 15:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是肝星状细胞，1640培养基含10％胎牛血清，长的不均匀，最近觉得生长减慢，特别是在细胞部分可以看到有些大的黑色颗粒，而其它地方几乎没有，培养基从没有混浊，不知道是否污染了？支原体？请指教，谢谢。

附件

2012-7-12 15:23

93253033.snap.jpg (43.33 KB)

轰轰[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75630
精华 0
积分 235
帖子 209
信誉分 100
可用分 1866
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态离线

发表于 2012-7-12 15:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

还有一张

附件

2012-7-12 15:23

32071598.snap.jpg (46.03 KB)

ending[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态离线

发表于 2012-7-12 15:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

I think that your cells are not contaminated.
Try add some Gln in your media.
大的黑色颗粒 maybe dead cells and their debris.

bohe221[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74583
精华 0
积分 419
帖子 457
信誉分 100
可用分 3228
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-7-12 15:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

勤换几次液，看还有没有，有的时候是因为培养基耗竭，细胞得不到营养，而出现的死细胞。如果细胞贴壁还算牢的话，建议在换液之前用PBS洗一下.

dog002[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76386
精华 0
积分 916
帖子 1452
信誉分 100
可用分 8133
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态离线

发表于 2012-7-12 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是细胞长老了，很难长好回来，建议拿其他的来养，以后传代要勤一点

zwsyrt[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79787
精华 0
积分 594
帖子 867
信誉分 100
可用分 5136
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态离线

发表于 2012-7-12 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

出现这种情况，可能有以下几个原因：
1、与血清灭活有关通常血清在经过热处理之后，其中沉淀物会显著增多，在镜下观察像是“小黑点”，并且常会误认为是血清被污染了，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。不过一般而言，此小黑点不会影响细胞之生长。
2、营养不良从您传上来的照片看好像是营养不够，觉得细胞生长的状态不是很好，建议改善或勤换培养液。
3、死亡细胞造成已经死亡的细胞如果不及时去除，它会产生大量有害物质（细胞内容物释放），如线粒体等，在显微镜下观察也呈现黑色小颗粒状。
多摸索几次，逐渐会好的，实验就是这样，希望那个我的回答对您有益。

dotaaa[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74170
精华 0
积分 461
帖子 621
信誉分 100
可用分 3880
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态离线

发表于 2012-7-12 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Posts: 52
Score: 26

langlang[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77033
精华 0
积分 668
帖子 976
信誉分 100
可用分 5741
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态离线

发表于 2012-7-12 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我在养的鼻烟癌细胞刚刚也有发生过类似你这样的情况，也是会在培养基中发现有黑点，并且有细胞碎片漂浮。我请了我们实验室的主任给我看了一下，他说不是污染，是营养不够，建议我一天换一次液，培养基的血清量可以加到15％，并且改用250ml培养瓶（我原来使用的是50ml的），一个星期以后，那细胞就长的不错了，不再用细胞碎片漂浮了。
希望我的方法对你有用。

summerxx[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 75852
精华 0
积分 885
帖子 1388
信誉分 101
可用分 7783
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态离线

发表于 2012-7-12 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近我的杂交瘤细胞也有类似情况,我觉得是微生物(某种寄生虫污染),高倍镜下仔细观察能看到虫子,虫子在细胞内寄生,传代次数越多,虫子越多,培养液偏碱性,细胞逐渐破碎,基本上就不回来.建议从新培养,血清在用之前镜检(高倍),注意该污染非细菌,也不是支原体和衣原体,所以培养液一般不变浑浊.

flower-201[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74055
精华 0
积分 443
帖子 605
信誉分 100
可用分 3785
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态离线

发表于 2012-7-12 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

感觉像细胞碎片

15 1/2 1 2 ››