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标题:[求助]培养Caco-2细胞

is2011[使用道具]
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1
 

[求助]培养Caco-2细胞


我正在培养Caco-2细胞,是第一次培养细胞。希望大家能给与一些建议~~
文献中提到要24h换一次培养液,学姐又说变黄才用换,请问到底该怎么做呢?还有,我们需测TEER值,但是学院里没有条件,请问有什么较好的替代方法吗?
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tianmei001[使用道具]
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可以选用DMEM培养液,至于什么时候换液或传代应根据具体情况,不必拘泥于所谓的文献。
Caco-2细胞贴壁后比较“薄”,细胞也比较娇气,祝好运!
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remenb[使用道具]
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3
 

我也在做TEER,主要是测定单细胞层的 完整性。甘露醇也可以用,TEER是重要的 指标,买一台仪器吧,1万左右。
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zzzz[使用道具]
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4
 

电阻仪,太贵了,但又是必备阿
Caco-2 细胞单层模型的评价:
1、细胞形态学(小肠微绒毛结构及细胞间紧密连接) ;
2、小肠刷状缘细胞标志酶———碱性磷酸酶的活性;
3、Caco-2 细胞单层的跨膜电阻( transepithelial electrical resistance ,TEER) ;
4、漏出标志物(甘露醇、荧光黄等) 被动扩散的跨膜通量;
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is2011[使用道具]
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请问楼上,4、漏出标志物(甘露醇、荧光黄等) 被动扩散的跨膜通量
用什么仪器测定呢?请指教~~~
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is2011[使用道具]
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6
 
我在长沙湘雅,可能是本市第一次培养这种细胞呢。用来做药物吸收的体外试验。对这试验的一切都在摸索中,希望大家给与一些帮助!
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fei1226com[使用道具]
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7
 

我也正准备进行caco-2细胞实验,但对此还不是很了解。请问xkfang1018,是不是你说的这4种评价方式都得进行测试呢?还是只做一种就可以评价caco-2细胞单层模型?
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请问各位,培养caco-2 细胞需要的DMEM 培养液成分:DMEM、小牛、非必须氨基酸、谷氨酰胺、丙酮酸钠等的比例如何?
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qumm1985[使用道具]
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9
 

10%FBS+DMEM+NEAA1%+谷氨酰胺1%+双抗
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tianmei001[使用道具]
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10
 

为什么我培养这个细胞的时候觉得这个细胞很好养啊,只要不污染就行了,生长的很快,可以多层的生长,不过如果去做模拟模型的话,就需要种板的时候单层了。
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