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标题:[求助]DMSO对细胞 有毒性作用吗？

qqq111[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]DMSO对细胞 有毒性作用吗？


复苏3天了，复苏时直接加血清于复苏后细胞中（未离心去冻存液，70%RMPI，20%血清，10%DMSO）。这样的DMSO对细胞有毒性吗？
急啊，谢谢了。
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

浓度过大时，DMSO有毒，我就是这么做的，细胞都死了，如果终浓度不超过1％，应该没有问题的
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wsll[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DMSO对细胞是有毒性的。最好是离心去掉DMSO
但是要看细胞的种类和特性，有些细胞即使不离心去掉DMSO也可以长的蛮好的（比如说猪主动脉内皮细胞）。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DMSO对细胞当然有毒了，要离心去掉的！
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不同的细胞对DMSO的反应是不不同的
我做过DMSO对7402和823细胞的生长抑制
7402的半数抑制浓度大约是5%
823的要相对多些，接近20%
用的培养液浓度的降低可能还有些影响，所以不一定就全市DMSO的影响
我们想象一下在培养液中加20%的水会怎么样
我没有尝试我不过可以想象
所以当复苏时直接加培养液可以尝试，但是应该多加培养液
如果复苏不活也不要单纯考虑DMSO的影响吧
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xyw5[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没什么关系,但是复苏后第二天要换液以去掉DMSO,减少对细胞的影响. 一般是复苏时离心去掉DMSO.
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DMSO在常温的时候对细胞有毒性非常大，但在4℃的时候毒性已经很小了~~~所以在冻存细胞的时候,用的预冷的10%DMSO+90%FBS的冻存液.在常温下千万不能含有DMSO,对细胞的损害非常大.复苏后,马上加10倍体积或20北体积的大量DMEM或RMPI1640或PBS,然后离心后,把上清去掉,用含FBS的培养基再重悬后接种到培养瓶或培养板中.
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发表于 2012-7-20 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

浓度不能超过10%,最好复苏当天离心一下!
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

必须离心的，冻存可能用的是10%的DMSO，如果解冻的1ml冻存细胞加上4ml培养液，估计DMSO的浓度为2%。有人实验过，低于1%，没有影响；1%~2%，影响不大，大于2%，明显影响。
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zzzz[使用道具]
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发表于 2012-7-20 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DMSO对细胞是有毒性的，但不同种类的细胞对其的反应不一。我们实验室主张复苏时立即离心去除DMSO，即在复苏时加入10ml培液，滴管小心吹打均匀后离心，再接种。复苏后的细胞长的挺好的。
也有的实验室在复苏后第二天去除DMSO的。关键要看细胞对DMSO的反应了。有时复苏后细胞长的不好还可能是在冻存时细胞状态不佳造成的。
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