细胞世界

谢谢楼上老师的指点。
我用的是师兄留下来的冻存细胞，问了师兄应该没有什么问题。
复苏过程应该没有大问题，唯一的一点就是我看见有帖子说不应该把动存管的口子浸在水里，是不是我复苏过程中把整个动存管浸在水里导致污染呢？
然后培养基，我们这个是第二次复苏了，第一次情况一样，也是一个星期就死得差不多了。这次我们换了新的培养基，也是用的invitrogen的含有谷氨酰氨的1640培养，加10％小牛血清。会不会和配培养基时血清里面还有残留的冰有关系呢？

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如果是污染，镜下会看的到的。我觉得即使把冻存管直接扔水里，也不会这么容易污染。否则在液氮罐里早就进了液氮了。我也曾经把冻存管直接扔水里，没什么问题。不过操作小心点，是个好习惯。
细胞是用什么冻存的？DMSO还是甘油？冻存的步骤怎么样？多长时间没有复苏了？
我曾经看到过一篇文章，说复苏的细胞对冷冻的培养基很敏感。你的培养基是先配的，还是配了直接就用了？如果是后者，残留的冰当然会对细胞有伤害了。
另外除了解冻要快，解冻后加入培养基也要快，时间越短越好，我一般是把离心管装好了培养基，把一切都准备好了，再出去开液氮罐取细胞的。