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标题:[求助]用DMSO溶解的药物还需要过滤除菌吗？

yonger[使用道具]
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发表于 2012-7-22 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]用DMSO溶解的药物还需要过滤除菌吗？


准备做MTT 昨天种了三块96孔板 加了药 手都快痉挛了 可是今天一看几乎三块板子全都染菌了 呵呵 打击太大了，，，，，
用的药是用DMSO溶解 的 然后稀释 因为量太少就没过滤除菌了。。。。会不会是这个问题呢？
有哪位前辈指导一下呢？十分感谢！！
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-7-22 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果你用DMSO溶解的药物是无菌的，并且所有操作都在超菌台进行，是不需要过滤除菌了，因为我们实验室也有老师是这样做的，你种板的污染有可能是其他操作造成的了。
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1 DMSO溶解药物可以不过滤除菌，如果你持续加药时间不是很长（我试过72小时）应该没有问题。

2 但是操作过程应该尽可能的避免污染的机会，我的操作过程如下：

（1 ）称量药品时用的瓶子是无菌的，取药时我是用灭过菌的勺子。
（2）加DMSO溶解药物在超净工作台上进行。
（3）加药时也要小心。
总之，只要严格无菌操作应该没有问题，我们主任（我是细胞生物专业的）曾经在原代培养时用自来水冲洗组织（小试验），培养的细胞照样没有污染。

个人观点供参考！
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ending[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用过dmso溶解过药品
只要严格按照无菌原则操作 不用虑 也不会污染
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nn255[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人也用过DMSO溶解过药品,其实不需要像楼上的各位所说的严格按照无菌原则操作来保证药品本身,药品称量,溶解药品等每一个环节都无菌.(当然都保证了更好!)因为ＤＭＳＯ本身作为万能溶剂，在溶解药物的同时，可以将药品中的细菌杀死！无菌操作只限于你用无菌培养基稀释时和加药时．

我做活性追踪实验时，大部分的提取物都是需要用ＤＭＳＯ来溶解的，我只是在ＤＭＳＯ溶解后，才将其拿到无菌操作台上．稀释的时候请注意：
不是用无菌的培养基直接加到你的ＤＭＳＯ样品中，而是算好稀释量后，先将无菌培养基放入无菌的稀释用的管子或瓶子里，然后再用无菌枪头吸取ＤＭＳＯ样品．再请注意：枪头只吸取液体不能碰到其它．同样加到稀释管／瓶子的时候也不能碰到器壁！然后你现换用新枪头进行混匀．
这样操作本人无一失手！
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summerxx[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该是不要的，我们这边做的很多都不用的，还没有染菌的
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不能除菌的，DMSO会把滤膜溶掉的
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ending[使用道具]
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发表于 2012-7-22 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以用尼龙膜过滤，没问题
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2012-7-22 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.dmso溶解后不用过滤
2.加药用排枪好，既快又省力，污染的几率也减小了，我一次做12个板子也不累
3.板子如果是酒精泡的，先用力甩干，再在超净台上吹干，你可能不是染菌，有可能酒精没有吹干，如果你用一次性的板子，不会存在这样的问题
4.昨天种的板子，怎么当天就加了药呢？要等细胞进入对数生长期的，再说今天依据什么判断已经染菌了呢？也有可能就根本没有污染
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yonger[使用道具]
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发表于 2012-7-22 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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2006-09-13 20:48
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1.dmso溶解后不用过滤
2.加药用排枪好，既快又省力，污染的几率也减小了，我一次做12个板子也不累
3.板子如果是酒精泡的，先用力甩干，再在超净台上吹干，你可能不是染菌，有可能酒精没有吹干，如果你用一次性的板子，不会存在这样的问题
4.昨天种的板子，怎么当天就加了药呢？要等细胞进入对数生长期的，再说今天依据什么判断已经染菌了呢？也有可能就根本没有污染
我是临床专业的小科室的小硕 没有自己的实验室 更别说排枪了：（。确实没有污染 是细胞碎片

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还想请教大家一个问题 有没有人在用dmso溶解药物后药物溶解很充分但 用培基稀释时 药物又析出了的？这是怎么回事呢？
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