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标题:[求助]培养液pH不稳定的问题

8s5g[使用道具]
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[求助]培养液pH不稳定的问题



请问细胞培养液打开瓶盖后即迅速变紫,pH明显升高,请教是怎么回事?如何解决?
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lagua123[使用道具]
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CO2跑出去了吧.
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兔唇[使用道具]
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迅速变紫,从未碰到过
加些HEPES试试
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hot_hot_hot[使用道具]
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培养基在配置的过程中一般要加入一定量的NaHCO3(根据包装说明而定,一般不通批号的培养基加入的量也不一样)以调节培养基的PH值。而
NaHCO3遇热不稳定,会分解释放出CO2,而使培养基的PH升高,偏碱。
因此在配置使用培养的过程中应注意:
(1)动作迅速,不可使培养基长时间处于较高室温下(特别是夏天)。
(2)在混匀的过程中切不可加温加热,我们室一般用磁力搅拌器进行混匀10-15min(不加热),之后调PH(7.2),立即放入4°C冰箱,待过滤时再取出。
(3)使用时不要将瓶身放在酒精灯火焰上烤,只需瓶口对着火焰。
(4)用完后尽快将瓶口封好,放回4°C冰箱保存。
你可仔细回忆,是否有将培养基放在温度较高的环境内,较长时间?
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hot_hot_hot[使用道具]
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上面打错了,PH升高,偏碱。
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junhun[使用道具]
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我也遇到和楼主一样的问题。购买的培养基是Gibco分装的液体培养基,过一段时间培养基就变成紫色。白云怡意的分析挺有道理的。但是曾经遇过有一瓶新买的培养基,还没有开封,并且放在4摄氏度冰箱中保存,也没有超过保质期,但是也变成紫色,因为怕影响细胞生长不敢使用,好可惜。 请问这怎么解释呢?谢谢!
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8s5g[使用道具]
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曾有人建议我变色后加入少许NaHCO3,不知可行?
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缘yuan[使用道具]
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你可以把培养基瓶盖松开放入CO2培养箱中15'-30',通过通入CO2来调整培养液的PH值,试试看吧
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junhun[使用道具]
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加NaHCO3是不行的,因为它本身是碱性的,只会适得其反。
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junhun[使用道具]
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补救措施:
可以将装培养基的培养瓶稍微松一下口,放入培养箱中一段时间,具体时间根据培养基变紫的程度而定。原因是培养箱中的co2会调节PH。
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