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标题:[求助]贴壁细胞传代后第几天可以换液

avi317[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]贴壁细胞传代后第几天可以换液



请问贴壁细胞系传代后第几天可以换液
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49888[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大概3~4天换一次液，我用的是MEM培养基，其实你可以通过培养基的颜色来判断的。当培养基的颜色由红色渐渐褪成黄色，说明细胞在生长过程中排出的废物使培养基变酸了，这个时候就该换液，不然变酸的培养基会影响细胞的生长，使细胞变圆、脱落。
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avi317[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

传代之后短期内需要把死细胞去除吗？
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qqq111[使用道具]
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 小中大

传代之后将死细胞去除有助于活细胞的贴壁及生长，因为细胞死亡后释放出来的内源性毒性物质 如蛋白酶等将影响正常细胞的生长。当然这也有量的问题，如果死亡细胞数目不多，基本上对细胞的生长没有明显的影响，但是如果特别多 最好等细胞贴壁后通过换液加以除去。这一点对于转染细胞的初次传代特别重要
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xingyi08[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般贴壁细胞在4小时以后开始贴壁，这时候最好不要进行换液等操作。在细胞完全贴壁以后，再用PBS缓冲液进行冲洗，换液。
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发表于 2012-7-22 18:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
三个问题请教一下:
1.传代换液时,把没贴壁的细胞重新接种,能贴壁生长吗?
2.每次换液都需要用pbs洗吗?
3.有两种换液方式:去一半换一半和全去全换.请问,去一半换一半是用于什么时候,细胞维持生长的时候吗?
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发表于 2012-7-22 18:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上的问题：
1。如果你的细胞是贴壁的，在你换液时，仍没有贴的，考虑下是否是已死亡的细胞。
2。没必要。
3。这个我也不知道，等待达人。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
换液方式:去一半换一半是为了细胞逐步适应新培养液,避免细胞外环境大的变化,特别对于原代培养的细胞来说比较重要.
随着细胞的生长,培养液中细胞自身的代谢产物会累积,这就需要通过换液去除,但是作为群体生长的细胞他们之间也会释放有助于生长的物质到培养液中,这就要求我们换液是采取半量换液的方法.既可以除去代谢产物又可以保留适量的促生长物质,同时避免了外环境的大波动.这对于原代培养特别重要.
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bohe221[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是贴壁细胞,不需要用pbs洗涤．直接倒去一半培养基在加新的培养基就可以了．
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2012-7-22 18:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不一定每次换液的时候都要用pbs洗的，因为用pbs洗的作用主要是为了洗到血清，免得在接下来用胰酶消化的时候，血清的残留会影响胰酶的作用，如果只是换液，并不传代，不用pbs洗也行的
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