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标题:[求助]疑是细胞污染！请大家帮忙看看

lagua123[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]疑是细胞污染！请大家帮忙看看



细胞株：A375
培养基：DMEM
存在问题：细胞换液后培养基中疑是污染物（很细腻的漂浮的成团的，具体见图片）就干净了。疑是污染物似乎并不影响细胞的生长（细胞生长很快）。此种情况已经有半年了。反正看起来不干净。
目前没有做任何处理，还是用它来做效应。可是心里总有点不放心。马上就要转质粒了，有点担心。
图片如下,箭头所指就是疑是污染物！


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2012-7-25 10:47
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lagua123[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有一张，细胞是黑素瘤细胞A375.


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summerxx[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
死细胞吧，不像是污染啊。
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发表于 2012-7-25 10:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你细胞传代时是用胰酶消化还是直接用吸管吹打下来，一般这个情况在直接吹打传代的时候容易出现。至于是不是细菌污染偶倒没经验，期待高手解答吧~
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lagua123[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
们是先胰酶消化让后血清终止后吹打，现在A375细胞贴壁比较紧，可能吹打有点猛。
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最好用胰酶消化，首先确定培养基有无问题，是否有此现象，可悬浮后离心看一下，能否去除，如为细菌污染培养基会混，而不是这样，估计细胞碎片可能大，如怀疑污染可作一下革然氏染色看一下。
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lagua123[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚刚看了一下细胞污染的图库，心有点寒啊。
好像倾向于真菌污染啊。有没有碰到过和我类似现象的战友啊！
有的话帮我分析一下！
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发表于 2012-7-25 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我以前的细胞也出现过这种情况，以后的转染实验肯定是不行的，主要是因为细胞系的问题，建议你换一种细胞系或者是重新复苏一下。新的细胞注意酶消化程度和初始铺板密度会好的。
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发表于 2012-7-25 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想顺便问一下,图片中黑雾一样的东西是什么?我养的细胞也有这种东西,刚开始我以为是霉菌污染,就将细胞换液了,先用PBS洗,然后加10倍冲击剂量抗生素的新鲜培养液。可是刚换完液，仍有这种黑雾一样的东西，难道是瓶子脏么？谁能帮我分析一下，我的细胞到底有没有污染呢？细胞长的还可以，培养基未见浑浊。
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jkobn[使用道具]
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发表于 2012-7-25 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也有这种情况,但并没影响我的转染,应该不是污染,但我也说不清是什么
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