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标题:[求助]荧光染色拍照

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发表于 2012-7-25 12:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]荧光染色拍照



　　恳请赐教！
　　最近在做ＨＯ３３３４２hela肿瘤细胞凋亡染色拍照，效果总是不好，照片不清晰，荧光没什么效果，而mtt检测效果良好．
　　请教荧光染色注意事项，特别是荧光拍照过程操作，主要是拍照过程的调试．谢谢！
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发表于 2012-7-25 12:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也碰到过这个情况，镜下观察，胞核染色相当漂亮，胞浆透明或呈淡染。

我用的是摄像机，拍下来就分不清胞核和胞浆。看来还是像素的问题，另外

相机一定要固定好，尽量不要晃动。拍摄模式个人感觉好像差别不大，一般

选夜间或自动模式都可以的
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发表于 2012-7-25 12:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢指点!
想再问问:我是用相机的,尼康的荧光显微镜,请教一下具体的拍照前的调试步骤,我正一点点排除原因,现在怀疑在染色上和调试过程中是不是出了问题?
那位高手赐教一下!谢谢!
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发表于 2012-7-25 12:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

目镜下如果较亮但不清晰, 是物镜问题.
目镜下清晰但拍不好可以延长曝光时间
是用数码的拍吗
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发表于 2012-7-25 12:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢！
　　胶卷拍照的．我想再问问拍照之前的调试操作步骤能不能说详细点，因为没有说明书，所以我现在做只是大概的根据别人的建议调的．多谢！
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发表于 2012-7-25 12:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶卷拍就太难了, 一要控制齐焦, 即先调目镜看清取景框, 再用该目镜看,调焦距看清样品.
如果有自动点测光的相机, 就根据该曝光值曝光, 如果是自动面测光, 则要在曝光时间上根据荧光面积大小减少曝光时间(少减,多减, 是根据经验的). 如果没自动测光, 就根据经验来吧.
能 用低倍镜就不用高倍的
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发表于 2012-7-25 12:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

强烈谢谢!
没办法机子比较老,没有数码接口.只能按你提示的再试试!
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发表于 2012-7-25 12:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问高手有相关照片参考么?谢谢!
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发表于 2012-7-25 12:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

忘了, 如果拍得不太好, 可以自己到充印店要求曝光补偿
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