[求助]关于白细胞分离时遇到的具体问题

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标题:[求助]关于白细胞分离时遇到的具体问题

ALALA[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1、用等量PBS稀释抗凝血时如何将其混匀，搅拌还是晃动？会不会造成溶血？
2、在往淋巴细胞分离液中倒稀释外周血时可以用移液管吗？直接倒我控制不好速度，有时分层界面会不清，甚至混合。中间有小技巧吗？
谢谢!

loli[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1 溶血?我从来没有考虑过这个问题。每次都是用吸管轻轻吹打均匀，没发现什么不妥。
2 要用移液管。把装淋巴细胞分离液的试管倾倒45度，移液管顶端抵着试管壁，离液面远一些，减少血液对淋巴细胞分离液的冲击，让抗凝血沿管壁慢慢流到淋巴细胞分离液上。然后再慢慢的直立起试管。就可以离心了。
其实好简单的，自己搞一两次就会了。原来没有人教我，我抽自己的外周血来分离，练熟了才去收集标本。

yysr238[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

其实用胶头滴管就可以了，但是加的时候试管一定要倾斜，滴管顶牢试管壁慢慢加就可以了，移液管操作起来可能有点困难

pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

纠正战友一个说法：白细胞与PBMC与淋巴细胞并不是等同的概念。您现在要做的似乎是PBMC的分离，而不是白细胞的分离。
白细胞：包括了中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞，单核细胞。
PBMC：外周血单个核细胞，主要包括了淋巴细胞（80％以上），单核细胞（10％左右）。
淋巴细胞：主要是分为T/B淋巴细胞。是PBMC的主要成分。

ALALA[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那请教楼上，我要分离白细胞怎么做？

DDD[使用道具]
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发表于 2012-7-25 12:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那请教楼上，我要分离白细胞怎么做？

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有专用的白细胞分离液，可分出单核细胞和多核细胞两层。

ALALA[使用道具]
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