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标题:[求助]为什么总出现细胞团？

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发表于 2012-7-27 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]为什么总出现细胞团？


请教各位大虾：我养的HL-60细胞，悬浮生长，培养基用的1640加10%胎牛血清。细胞状态很差，复苏后长的很慢，换液后第二天就出现细胞团，还比较多，不知道是为什么？还有必要再养下去吗？发愁阿！
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发表于 2012-7-27 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞团是聚集的死亡细胞。

注意两点：
1、复苏时最好立即离心去DMSO
2、如果绝对无菌操作的话，培养不成功多半是由于培养液pH值的问题，所以一定要调好！！！你可以取出一些你使用的培养液通过pH计测试一下。
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发表于 2012-7-27 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

hl-60细胞本来就是成团生长的！
有什么可以怀疑的吗？
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 小中大
我也在养HL-60细胞,它就是成团生长的,成团并不代表不好啊,如果成团的细胞包膜不完整了,那就说明是死亡了,你的细胞生长速度怎么样?你说的状态差是什么意思?
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发表于 2012-7-27 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞团是聚集的死亡细胞。

注意两点：
1、复苏时最好立即离心去DMSO
2、如果绝对无菌操作的话，培养不成功多半是由于培养液pH值的问题，所以一定要调好！！！你可以取出一些你使用的培养液通过pH计测试一下。

————————————————————————————————————————————————————————————————

用我的培养液试过养贴壁的肿瘤细胞，长的很好，第二天就贴壁了80%。养K562很失败，细胞几乎不长，改换HL-60复苏后长的较慢，换了两次液都出现细胞团，HL-60是成团生长吗？还是复苏前K562和HL-60细胞的问题?
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发表于 2012-7-27 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
hl-60细胞本来就是成团生长的！
有什么可以怀疑的吗？？

——————————————————————————————————————

哦，我以为和K562细胞一样悬浮生长。那细胞团长到什么程度时传代或换液？
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发表于 2012-7-27 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也在养HL-60细胞,它就是成团生长的,成团并不代表不好啊,如果成团的细胞包膜不完整了,那就说明是死亡了,你的细胞生长速度怎么样?你说的状态差是什么意思???

————————————————————————————————————————————————————————————————

少则5、6个，多则10来个左右的细胞成团，成团的细胞比较大，未成团的细胞就比较小、分散，这正常吗？成团到省么程度传代或换液？
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发表于 2012-7-27 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室养了大量的HL-60,细胞都是单个生长的啊，没有成团的现象。HL-60细胞比较敏感，养的要仔细一些。另外，传代密度不要太小，这可能是聚堆的一个重要原因。当然，细胞处于分裂期的时候会有3，4个聚堆的现象，但和别的聚堆生长的细胞明显不同。
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发表于 2012-7-27 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养过K562细胞，在复苏的初期，细胞还没有进入对数生长期之前，会有一个时期细胞处于分裂阶段，这时细胞在镜下是呈团的，这种细胞团中可见每个细胞是完整的，而且胞质透亮，胞膜是光滑的；而状态不好时的成团的细胞膜是不完整的，甚至能看到胞内容物已经游离出来，呈现老化的细胞表现。所以成团的细胞应该仔细看每个细胞的状态
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发表于 2012-7-27 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

悬浮细胞生长过程中，本来容易成团或连成片状，观察细胞，只要每个细胞膜清晰，细胞透亮，就没有问题，当然细胞结团太大，中间的细胞营养不够充分，会影响细胞状态， 就应该传代了。

所以LZ的细胞状态和成团没有必然联系。
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