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标题:[求助]有做无血清悬浮培养的吗?

orangecake[使用道具]
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[求助]有做无血清悬浮培养的吗?


如题,如今大规模哺乳动物细胞培养已经成为生物制药行业的一个重要趋势之一,其涉及的方面非常多。目前实验室阶段主要涉及细胞株的构建、搞通量筛选、无血清驯化、无血清培养基的设计和优化、培养条件的选择、细胞代谢分析及补料策略的优化。

我接触这个时间不是很长,但知道国内在这方面非常薄弱,据我所知即使是有血清培养,国内在抗体表达量上也做不到克级(抗体的表达量比其他蛋白都偏高)希望和大家分享我的经验以及得到您的建议,同时了解一下国内同仁的进展。
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mimili_901[使用道具]
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我也感觉讨论这方面的太少了,这正是制约我国生物产业化的关键所在!

百泰的大规模培养好像做得不错哦?
如果是做产品,应该是SFM吧
有比较了解的么?
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bananapeople[使用道具]
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也许好多问题并不能放到层面上去讨论,做sfm的人很少跟别人去讨论怎么优化配方
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我现在也在做这方面工作,如果没有合作单位,实验室总是无法大规模生产拿到足够的样品。
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orangecake[使用道具]
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楼上的兄弟,你意思你主要是为了拿到蛋白不是为了做工艺优化是吧?
你做的是哪方面的工作?
如果你了解的话,其实实验室是可以拿到一定量的产品(如果是抗体,用摇瓶也可以做到1-2g)。
楼上的楼上:你的说法很对,配方对绝大部分做这个的人来说都是比较敏感的话题。但是任何事情都不绝对,接下来的话就不说了。

我发帖的主要是目的了解国内目前这方面的动态。据我所知,北京清大天一生物技术有限公司也在做这方面的工作,因为没有具体接触没有更深的了解。深圳、上海也有公司做这方面工作,但具体程度都不得而知。有的说得很厉害但是可信度不高,相对真实的信息其实个人对个人更可靠.....

说远了,没想到版主给我的帖子置顶了,晾了好几天我再不来说话就有点不好意思了,呵呵。

具体深入的工作我也还要努力探讨,这里来就当和同行们喝喝茶聊聊天,兴起时多说两句就是缘分了。
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orangecake[使用道具]
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Wurm FM., Production of recombinant protein therapeutics in cultivated mammalian cells, Nat Biotechnol. 2004 Nov;22(11):1393-8.
1)国外从构建到pilot scale的schedule


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orangecake[使用道具]
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2) 目前(2004年)所能达到的活细胞密度及抗体产量

尽管现在比较前沿的技术手段可以让活细胞密度达到107/mL以上,但这也仅仅占到整个培养体积的2-3%,而与之相应的微生物培养可以做到甚至30%以上。
这也就是说即使是目前技术力量最雄厚的公司它们也才刚刚起步,这对于我们国家的生物产业来说只要迎头赶上,并非不能超越这个差距。


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orangecake[使用道具]
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目前为了获得高产量的蛋白,主要有补料批次培养(Fed-batch)和灌注工艺( perfusion processes),后者是我们国内第一个治疗性人源化单克隆抗体产品的生产公司--百泰公司采用的技术。以我的理解,这两种技术各有优缺点,Fed-batch涉及到的代谢网络更复杂比perfusion process难掌握,perfusion process相对容易掌握,但规模化前景不很看好(产物浓度低、设备复杂而且容易发生污染)。

先写到这里吧,涉及不深点到为止。
在这个领域我觉得是非常有希望的,大家知道国外著名的生物公司genetech、amgen等公司在最近几年的生物医药产业的表现让很多人羡慕不已,其中奥秘和关键也在于它们的process development.
在plant cell culture领域我们国家已经做得很好了,代表的人物有华东理工的钟镇江教授。我不知道是否有dxyers在从事这项工作,如果愿意,也谈谈你的见解和主张。
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utt0989[使用道具]
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很多培养基都是做无血清悬浮培养的,做这个的也很多,特别是药物蛋白大规模表达。
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tieshazhang[使用道具]
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很多培养基都是做无血清悬浮培养的,做这个的也很多,特别是药物蛋白大规模表达。

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试问细胞培养做大规模的国内有几家?
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