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谢谢,我的融合实验过程是老板在做,我没插手。具体过程为:以10∶1的比例将脾细胞与SP-2/0骨髓瘤细胞混合于50mL刻度离心管,用20-30mL RPMI1640基础培养基洗涤2次,用手掌轻击管底,使沉淀细胞松散均匀,将此融合管移入37℃水浴中预热并轻轻旋转, 在60s内将1mL预热至37℃的50%PEG滴加到融合管中的沉淀细胞上,在5min内将25mL预热至37℃的基础培养基滴加到融合管中,第1min加1mL,第2min加1mL,第3min加1mL,第4min加1mL,第5min加完剩下的培养基,边加边轻轻转动离心管,37℃静置10min,1000 rpm离心5min,弃上清,加入50mLHAT 培养基,每孔0.1mL接种于已经培养有饲养细胞的96孔培养板,置37℃、5%的CO2培养箱中培养