[求助]是否为污染?

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标题:[求助]是否为污染?

superboy[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是我们实验室鼻咽癌cell×40下观察的图片
不知道图片中的絮状物是什么东西？因为发现有这种“共生”东西的时候细胞生长似乎被抑制似的，长的很慢、很瘦
被感染了，还是霉菌，还是……？
可是我们的培养液还是清亮的，未见异常现象
高手们分析一下,谢谢

附件

2012-7-30 15:45

88423422.jpg (56.17 KB)

zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

照片实在是不清晰，难以判断。
建议用相差显微镜进行观察确定。
不过看起来这团东西和细胞不在同一平面，如果继续培养不会增多则可能是：
血清中的渣滓，细胞大片脱落的残骸，或者是培养容器底面上的盐结晶。

superboy[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不好意思,因实验室条件有限,纤维镜是相差的但是我用自己的相机拍的可能效果不是很好
我觉得确实不在一个平面，但实际的培养瓶中有在一个平面的
这张（全图）？

附件

2012-7-30 15:46

45650222.jpg (54.75 KB)

vivian4123[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看起来应该是霉菌的污染。如果是培养瓶底部的结晶的话，形状应该规则一些，这个是絮状的。仔细观察一下培养液，如果很快变黄，便浑浊那就是污染了。还有，看看是不是有很多这种物质还是只有一个。更换培养液再进行观察。

superboy[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢楼上培养液不是很快变黄的，所以我也不是很明白为什么，怀疑血清的话，可是又发现不同的细胞培养瓶里使用同一批血清，有的有，有的却没有，培养瓶里的这种絮状物有很多是不止一个的，换液后发现还是有，只是变的小了一些似的？

misswu61[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看看会不会增多，如果增多的话就肯定是污染了；另外我觉得如果是血清里的蛋白沉淀的话颜色会比较深或浅的一妥，呵呵，

pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主，有无更高倍点的相片啊？
典型霉菌污染可以观察到絮状物周围有丝状的菌丝，您切换高倍镜仔细观察看看；　
另，您的絮状物生长周期如何请关注一下，
如果是细菌的话生长很迅速的，通常24小时内就可以观察到培养液变色、混浑，不过我也中过48小时才严重到可以发现的，如果是霉菌的话短期内培养液並不混浑，但是继续培养絮状物数目会增多，这是污染跟血清渣渣最重要的不同点；

————————————————————————————————————————————————————————————————

怀疑血清的话，可是又发现不同的细胞培养瓶里使用同一批血清，有的有，有的却没有，培养瓶里的这种絮状物有很多是不止一个的，换液后发现还是有，只是变的小了一些似的？

pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果是血清渣渣的话，我的确也有看过长的真的很像污染的絮状物，无法从肉眼经验鉴别，只能持续追踪观察，
而且同一批血清不一定每次抽到的都是有渣的，咱抽同一瓶用同管血清配的medium丢到24孔板，有的well就是会有渣，有的就是不会有，机率random；

当然，最好的方法建议您还是抽取怀疑有污染的培养液作培养，准确一点就拿来涂plate制片检验，不过俺是懒人一枚，培养液抽起来绑温箱摇了有怪怪就当它是有问题了，赶紧处理掉～

楼主持续关注啰~
但一旦发现絮状物会增加或污染有扩大请赶紧处理并且查找污染源，真菌污染远比细菌来的可怕，具体应对霉菌的法子园里很多老大们说过了，就不献丑了，哈~

windy+++[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我养的皮肤成纤维细胞也是这样的，刚开始长得很好，细胞接近铺满，准备第二天传代，结果第二天发现里面很多这样的絮状物，很多细胞都没有了，真是不知道怎么搞得，而且第一瓶是这样的，到第二瓶的时候，也是第一天很好，准备第二天传代的时候出现了这样的情况。好多地方原来很多细胞]，现在都变成了空白，估计是霉菌污染了。但是很郁闷就是，第一天还很好，准备第二天传代，就出问题，我估计是观察细胞的时候出现了污染。

BUK[使用道具]
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发表于 2012-7-30 15:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我没养过鼻咽癌cell，但养过结肠癌cell，结肠癌cell在培养过程中会长成团状，在低倍显微镜下看起来和你的照片上的絮状物差不多。
确定是否污染可用接种针挑出一小块涂片，然后用高倍显微镜观察，如果不是菌类污染，则可考虑是不是细胞或血清内的絮状沉淀物。我没养过鼻咽癌cell，但养过结肠癌cell，结肠癌cell在培养过程中会长成团状，在低倍显微镜下看起来和你的照片上的絮状物差不多。
确定是否污染可用接种针挑出一小块涂片，然后用高倍显微镜观察，如果不是菌类污染，则可考虑是不是细胞或血清内的絮状沉淀物。

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