[求助]请教细胞周期与细胞死亡方式之间的关系

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]请教细胞周期与细胞死亡方式之间的关系

16 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]请教细胞周期与细胞死亡方式之间的关系

qhyu[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77304
精华 0
积分 705
帖子 1049
信誉分 100
可用分 6111
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态离线

发表于 2012-7-31 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

细胞的死亡方式包括：坏死性细胞死亡和细胞凋亡

请问这两者与细胞周期阻滞之间有什么关系？

不如某种药物能抑制特定细胞的生长，我应该如何分析细胞的死亡方式与细胞周期阻滞之间的关系？

ALALA[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77477
精华 0
积分 671
帖子 1002
信誉分 100
可用分 5901
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态离线

发表于 2012-7-31 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

就我所知，抛砖试试，请高手指正！现在比较公认的是细胞凋亡是细胞周期相关事件。例如p53同时对细胞周期和凋亡十分关键。关于坏死，由于其机制相对复杂，与细胞周期关系好像没有相关报道。
关于试验设计我想你可以sub-g1法检测细胞周期分布，API法可以检测周期特异性凋亡。具体可以在园内搜索一下。
祝你好运！

abc816[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77362
精华 0
积分 775
帖子 1190
信誉分 100
可用分 6817
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态离线

发表于 2012-7-31 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

方法很多，这里只说流式能作的：
每个样本分两份，一份annexinV-PI活染，另外一份固定后PI染。
这样每个样本就有两套数据，一个是坏死和凋亡的发生，另外就是细胞周期，达到一定样本例数后就通过统计做相关性分析。

园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8

UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态离线

发表于 2012-7-31 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对楼上所说的这个方法，俺有点疑问！
因为同一时间点的细胞做AV和PI凋亡率肯定不同。此时的A－V如果刚检测出凋亡的话，PI还看不出周期上的改变。而等到PI上明显变化的DNA出现时，A－V上的凋亡率已经很高以至于大多数都发生到右上象限了。这个问题我的实验中也涉及，本想用这样的方法来做，但苦于没有文献证明AV上的凋亡就是PI上的SubG1，且自己也没有想好如何证明，所以没有走这条思路。
如果发文章到高IF的杂志的话，这会被指出来的。而这又是实验中的一个单车道，没有办法解决会让整个实验搁浅的。
想过用分选加上共聚焦点方法来证明，但还是有问题。考虑中！

abc816[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77362
精华 0
积分 775
帖子 1190
信誉分 100
可用分 6817
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态离线

发表于 2012-7-31 10:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

没关系的。
1. 每一种凋亡模型其胞内生化过程都不尽相同，有的细胞凋亡早期只有PS flip，没有DNA fragmentation；但是也有的凋亡细胞这两种现象几乎同时出现。凋亡和周期的关系也同样不是严格保守的。所以重要的是自己的细胞模型自己摸。
2. 固染还没有出现subG1也没有关系，就看PS flip和cycle的关系也是很有趣味的。如果subG1和PS flip同时出现，比例（凋亡率）不match也很正常，本来检测的直接对象就不一样，本质反映一个是凋亡过程中膜内外PS分布不对称性的变化，另外一个是核内DNA片段化的程度，通过完全不同的指标间接定量凋亡率，为什么应该一样？为什么一定要证明是一样的现象呢？科学研究是追求简单的美感，而不是将问题复杂化。放松一些吧。

园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8

UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态离线

发表于 2012-7-31 10:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果想证明细胞周期特异性凋亡，那么可以采取
1，直接法来证明！
A：TDT法。