细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]新配的培基迅速变黄？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 18  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]新配的培基迅速变黄？

greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
1

发表于 2012-7-31 13:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]新配的培基迅速变黄？


各位大虾，我用的是1640，培基是一月前配制过滤并立刻-20℃冻存的。昨天解冻加15％的新生牛血清（四季青），试培一晚，可是我今晨发现培基已经变黄了，但是还是很清亮，高、低倍镜下没观察到任何东东。配制过滤前按说明加了NaHCO3 2g/L ,PH 7.4；瓶子、吸管等都是当日高温高压灭菌的；同一培养箱内有同学在养神经干细胞，他的倒蛮好，昨天换的液，今天还是红的呢。
求教这是怎么回事啊？急啊！
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
2

发表于 2012-7-31 13:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚才没有看清楚，还以为是大瓶里面的一夜之间全黄了呢！！
这样的话就是污染了！
不过现在看来应该是你的细胞长得太快，或者是细胞数量太多的原因，既然液体不混浊，估计污染的可能性不大！
问一句，你养细胞多久了，呵呵!
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
3

发表于 2012-7-31 13:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
按你说的，可能是你的细胞长的太快，如果不放心你可以把培养基和血清各吸４毫升放到灭菌的试管里，再将它们放到培养箱里培养，七天后看是否混浊．要不可能是你的培养箱co2的浓度太高，你看看，再联系．
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
4

发表于 2012-7-31 13:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我自己没有表述清楚，我是用当日高温高压灭菌后的玻璃瓶子，是没有接种细胞的空瓶子。
我养细胞4个多月了。之前一切都很顺利。因最近实验室改装，老换培养箱。
我想如果是污染了，镜下应该看得到东西啊。
CO2的浓度培养箱显示是5.2-5.3
如果七天后仍没有混浊就可以排出污染了吧？
顶部
lagua123[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77374
精华 0
积分 437
帖子 533
信誉分 100
可用分 3511
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
5

发表于 2012-7-31 13:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

根据你的描述应该不是污染了，因为污染后培养基不是清亮的，CO2的浓度也没有问题，因为你同学用一个培养箱。我认为应该是你的细胞长的过快的原因，你看你的细胞铺板密度多少，现在张满了么。如果张满了赶紧传代，培养基配好后都应该先进行检测再养细胞的。一般5－7天后培养基还是清亮的时候就可以确认没有污染了
顶部
wsll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76794
精华 0
积分 423
帖子 505
信誉分 100
可用分 3393
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
6

发表于 2012-7-31 13:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有细菌污染不一定非要变溷浊，变混浊大部分是因为细菌污染，而有些真菌类的污染，培养液是不会变色的，但是在镜下你可以看到菌丝或者菌体之类的东西！
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
7

发表于 2012-7-31 13:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教真菌污染的特点？一位同做实验的同学及我在园子里Search的真菌污染的图片，都是有菌丝和游动的亮点，可是我的在镜下仔细观察还是什么也没有啊！真是搞不清怎么回事
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
8

发表于 2012-7-31 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能,你的NaHCO3加的有问题,很明显缓冲不行
顶部
ffooll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73418
精华 0
积分 437
帖子 574
信誉分 100
可用分 3666
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
9

发表于 2012-7-31 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你说的问题是一个正常的现象,因为1640的缓冲能力相比较DMEM相差很多,所以一夜之间变黄很正常,不用担心,正常传代就可以了!
祝实验顺利!
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
10

发表于 2012-7-31 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我今天用此培基传了代，明天在观察；同时无血清培基及血清都用灭菌的试管试培，继续观察。
我想可能与换了培养箱有关系，但愿是楼上所说的情况，那就万幸了。
谢谢热心的战友们了！
顶部
 18  1/2 12››