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标题:[求助]MTT实验测的吸光度值是多少?

lgm[使用道具]
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[求助]MTT实验测的吸光度值是多少?



我在做mtt实验,发现细胞的密度很高了,可是测出的吸光度值是0.05-0.06,很低,大家做的范围大概是多少?
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sunnyB[使用道具]
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请问楼上的细胞密度是每孔多少个啊?
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TAT[使用道具]
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我也在做MTT,通过酶标仪出来的数据就象上表的格式,但不知这些数据如何处理,只知道采用t检验。我是新手,刚做有关MTT的实验,请各位多多指教!
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yapuyapu[使用道具]
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按分组,求平均值,根据公式:抑制率=(空白组-处理组)/(空白组-调零组); 在根据抑制率求IC50 值
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hulu呼噜[使用道具]
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一般是这样的值:

Endpoint Read Test Wavelength: 570 , Blank Subtracted                        
  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12
A  0.944  1.107  1.041  1.065  1.005  0.86  1.243  1.355  1.402  1.342  1.381  1.265
B  0.764  0.811  0.764  0.739  0.745  0.525  1.003  1.166  1.169  1.085  1.073  1.161
C  0.802  0.731  0.701  0.717  0.645  0.423  0.958  1.154  0.971  0.923  1.03  1.264
D  0.856  0.758  0.729  0.766  0.59  0.498  0.93  1.174  1.062  1.069  0.946  1.037
E  1.335  1.241  1.269  1.195  1.029  0.897  1.412  1.408  1.63  1.515  1.72  0.126
F  1.018  0.896  0.845  1.103  0.9  0.739  1.194  1.352  1.414  1.2  1.309  -0.103
G  0.868  0.871  1.028  1.135  0.788  0.679  1.192  1.207  1.123  1.018  1.192  -0.158
H  1.131  1.128  1.06  1.185  0.995  0.847  1.368  1.443  1.465  1.487  1.384  0.134

——————————————————————————————————————————————————————

你的数据是不是有点高啊?你一直都是这样的吸收度嘛?有些书上说490nm测定吸收度,和570nm有什么区别嘛?
请指教。
一般紫外法(用uv)测定的时候要求吸收度在0.2-0.8范围内比较准确,你这个都已经超过1.0,是否合适呢?

我也是新手,我测的数据(570nm)大概在0.4-0.8之间。希望都交流。谢谢
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owanaka[使用道具]
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由于是5.1节,我有几天没有上网了,给自己放了假,不好意思现在才来感谢!谢谢,我收到的邮件(来自zyq1980@163.com)也一定是您发来的吧。我打开了邮件,并且成功的使用了您给的计算IC50,万分的感谢!
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我看文献上都采用平均值±标准差表示的啊,而且也说采用t检验,是不是这个公式也可以算呢??
          对照孔测定的平均OD值一加药组测定的平均OD值
肿瘤细胞杀伤率(%)= -----------------------------------------------------------------------    对照孔测定的平均OD值

再乘100%。还有一个问题:吸光度值是不是就是OD值?这里的对照孔是只含培养液的孔吗?还是含有细胞的空白组??请多多指教!
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DDD[使用道具]
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我的数据在570下测的都是一点多,二点多的??怎么办啊
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lgm[使用道具]
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请问,具体怎样根据抑制率求IC50 值?

同问这个问题。

书上说,OD值与药物浓度的对数做曲线,求IC50 值,可是怎么求呢?

谢谢
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kswl870[使用道具]
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我也觉得很奇怪,前面看到不少战友都说MTT的OD应该在0.7-1.25之间线性比较好.也的确看到了有文献是这么写(英文),用这么高的OD做增殖曲线的(中文).
但是按照仪器分析书上讲法,分光光度计的吸光度不是应该落在0.2-0.8之间时线性才比较好么?
这样两者就有矛盾了啊.
请教有经验的前辈.
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