小中大我做的是两种多不饱和脂肪酸EPA和DHA对肿瘤细胞的增殖的抑制。文献报道中浓度是60umol/l,可是我做到300才有抑制,也就是这组的OD值才比正常或对照的值低。我分析了很多原因,细胞接种不均的原因应该不大。我现在估计是我在向没孔加入药的时候,没有考虑到这两种脂肪酸在培养基中的分散状态,因为他们密度比水轻,会不会浮在面上,而我加药时抢头是在液面下的,会不会因为这个原因导致我其实没孔里的药物浓度远远没有我设定的那么高,因为脂肪酸本身也是细胞生长需要的物质,在低浓度可能有促进细胞增殖的作用虽然文献没有报道。
我考虑加药时要反复吹打混匀。唉,MTT都做了快一个月了,还是没有出结果,郁闷阿!
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1. 我MTT做了三个月才出各方面都满意的结果,药物浓度就摸死了。文献上的不一定适合于你。
2. 所用药物的厂家不一,纯度不一所需浓度就不一样,我用过国产的和SIGMA的一种天然药物,所需浓度就差很远啊。
3. 多不饱和脂肪酸我就不懂了,密度比水轻那肯定会浮在面上啊,你的细胞是贴壁还是悬浮?
4. 促进细胞的生长不等于促进增殖,脂肪酸不是生长因子或生物活性物质不会促进增殖,我以为。