细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]加入过量谷氨酰胺对细胞有没有的影响

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]加入过量谷氨酰胺对细胞有没有的影响

北风那个吹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79353
精华 0
积分 232
帖子 162
信誉分 101
可用分 1561
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
1
 

[求助]加入过量谷氨酰胺对细胞有没有的影响



请问,我买的DMEM高糖培养基,已经含有谷氨酰胺,我没注意,在配制的时候每一升中又加入了0.37克,用来培养骨髓瘤细胞SP2/0 ,长的不太好,请问是不是与加入谷氨酰胺有关系,我的培养基还能用吗?谢谢!
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
2
 

谷氨酰胺分解会产生NH3,改变培养基pH,对细胞有毒性。谨慎使用!
顶部
rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
3
 
谷氨酰氨总含量低于600mg/L不会有很明显的细胞毒性。对于高密度种植的细胞最合适。
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
4
 

如果DMEM中含glutamine,应该是0.584g/L,再加0.34g,您说是不是合适呢?
顶部
北风那个吹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79353
精华 0
积分 232
帖子 162
信誉分 101
可用分 1561
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
5
 

我买的是GIBCO公司的高糖DMEM培养基,不知道含的谷氨酰胺是多少?
请问我配的培养液还能用吗?
我培养复苏的骨髓瘤细胞(原来使用1640 培养的),细胞数量不少,但是长势不均匀,有的细胞长得好 ,有的长得不好。是我加入谷氨酰胺的原因还是换培养基的原因造成的呢?
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
6
 

Gibco的高糖DMEM培养基和Sigma的是一样的吧?
顶部
北风那个吹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79353
精华 0
积分 232
帖子 162
信誉分 101
可用分 1561
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
7
 

不知道。请问谁知道Gibco公司的网址?
顶部
Ao7[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76545
精华 1
积分 647
帖子 790
信誉分 102
可用分 4976
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-7
状态 离线
8
 
在细胞培养液中谷氨酰胺是大部分细胞培养基的基本成分;

而谷氨酰胺是一种并不稳定的氨基酸,在中性的水溶液中会自发降解,虽然确切的降解率一直没有最终定论,培养基需要频繁地补加谷氨酰胺;
谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ◦C 冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时,应 重新加入原来量的谷氨酰胺;
所以我认为你补加进谷氨酰胺应该也没什么大问题。我们实验室曾经由于细胞生长不好而补加过谷氨酰胺。

你提到更换培养基,我觉得还是有影响的。细胞比较敏感,对一种新的培养基有一个适应过程。一般要换培养基的话是用半量换液法,循序渐进。
不过肿瘤细胞比较容易活的,养养就长好了。
顶部
北风那个吹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79353
精华 0
积分 232
帖子 162
信誉分 101
可用分 1561
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
9
 

我不是补加的,而是配制时候就多加的,培养基本来是含有谷氨酰胺,我又加入了0.37克/升。我最近又把胎牛血清的浓度提高到了15%,细胞很多,但是长势好,贴壁的只有10%左右。大多数细胞 胞内颗粒比较多。我再继续培养观察看看。不知哪位对此有什么好的建议或想法。
顶部
utt0989[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78340
精华 1
积分 660
帖子 975
信誉分 102
可用分 5663
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-28
状态 离线
10
 

我一直是用1640培养液培养的,加了350mg的谷氨酰氨,效果梃好的,而且我觉得用小牛血清就可以了,长的很好.
顶部