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标题:[求助]请问培养基里有沉淀是怎么回事？

milkdog[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]请问培养基里有沉淀是怎么回事？


我过年后配了四次培养液，每次配完都是清亮的，但是在-20度冻过以后，再拿出来化冻就会出现极微细的沉淀，沉在培养液底层，摇晃以后就会漂起，真不知是为什么，我认为操作过程不会有问题，滴定是用盐酸和碳酸氢钠，我的实验已经因此进行不下去了，请问这会是什么原因呢，请大家给予帮助，非常感谢！
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得很大的可能性是因为在－20冻过了。一般培养基是不能冻的。很有可能是一些成分因为冻融变性，从而溶解度发生变化。个人建议重新配培养基吧
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nn255[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那你养的细胞状态如何，建议放孵箱中过夜，看培养液是否污染。
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我印象中培养基是放在4度的，但是今天师兄要我们冻在－20度，不太明白到底怎么办好哦，谢谢！
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我配的是1640，年前配的也冻过，都没事，就年后重买了一批以后，配出来就有问题，会是1640本身的问题吗，或者是三蒸水里一些离子成份没完全清除的原因．
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star#room[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道你有没有加血清，我们经常在加血清后过段时间也会有这种现象，那是蛋白沉淀。至于单纯的1640我们一直放－20度的，倒没有发生这种现象。
总之，你作个无菌实验看看就好了。
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我没有加血清，是单纯的1640．
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00无名指00[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用-20度冻的1640一次后，再冻，再融化也有该现象，我觉得操作没问题，难道是蛋白变性？
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-8-2 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这种现象很常见．

培养基不管有没有加血清都不要放－２０度冻存．
并且配完过滤除菌后放４度也不要超过２个月．
所以一般一次不要配多了，最好一个月配一次．
出现沉淀并不是污染了，而是培养基里的一些成分在－２０度冻融变性沉淀下来了，如果你的细胞是诸如肿瘤细胞株之类很好养的类型，这种培养基也还可以用；反之就要重配了．

还有在调ＰＨ值时最好不要加盐酸或氢氧化钠，因为它会改变培养基的离子浓度及渗透压，不利于细胞的生长．你按照配方配好使溶质完全溶解就行了，虽然这时候会偏碱，但加血清后ＰＨ值还会变小的．在使用前提前半小时将培养基放入孵箱，其ＰＨ值及温度会达到所需要求的．
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发表于 2012-8-2 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你看一下你的培养基过期了没有，很有可能是一些营养物质过期变性了，且很少有人注意到培养基是否过期。
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