小中大【分享】垂直电泳在蛋白分析中的应用|蛋白分析的相关仪器
聚丙烯酰胺凝胶电泳是用于蛋白分析的常用方法，它是在垂直电泳槽中进行的一种电泳反应，在实验分析中的应用主要包括以下几个方面：
(1)在基因表达中分析目的蛋白质表达情况 在基因表达的实验中，为了确定目的蛋白是否表达，以及分析表达量的多少，我们收集表达后的菌液在垂直电泳槽中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。将凝胶用考马斯亮蓝或者硝酸银染色后，通过与标准分子量大小的蛋白进行比对，可以确定菌液中是否含有目的蛋白。将不同时间段培养的菌液同时跑胶，可以对不同时间段的表达量进行横向比较。如果要进行后期的拍照保存分析，可以利用数码相机，扫描仪或者凝胶成像系统进行。
(2)在蛋白回收过程中用于前期分离蛋白质 回收蛋白质的实验中，首先将样品在垂直电泳槽中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，不同大小的蛋白在凝胶上分成不同的条带。利用染色剂染色后，通过与标准分子量大小的蛋白进行比较，可以确定出目的蛋白的位置，将目的蛋白切下后进行后期的回收处理。
(3)在western blotting(蛋白免疫印迹)分析中用于前期分离蛋白质 在免疫印迹分析中，先将蛋白样品在垂直电泳槽中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，不同大小的蛋白在凝胶上分成不同的条带。然后利用转膜仪将凝胶上的蛋白样品转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，硝酸纤维素薄膜上的蛋白质作为抗原，与特定的抗体进行免疫反应，加入显色剂后，发生抗原-抗体反应的条带会显现出颜色，从而可以确定抗体的特异性，也可用于检测未知蛋白成分。如果要分析抗体的效价即浓度，还可以利用酶标仪做酶联免疫吸附测定。总之，如果是用于基因表达中分析蛋白质表达情况，或者回收蛋白过程中分离蛋白质，用户只需购买电泳仪电源和垂直电泳槽;如果要进行western blotting(蛋白免疫印迹)分析，用户需要购买电泳仪电源，垂直电泳槽和转印槽，进一步检测抗体的效价需要使用酶标仪。
