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标题:[求助]AO-EB染色的结果判定

cj_mondy[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]AO-EB染色的结果判定


如图所示，我的AO-EB染色图，结果判定方法很多，我判断：1正常细胞、2早起凋亡、3 晚期凋亡、4死亡，不知道对不对，请大家批评指正



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2012-8-7 11:27
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

据我所知AO／EB染色不能区分早期凋亡和晚期凋亡，你再查资料看看。如果你一定要区分早期和晚期，建议ANEXIN－V－FITC／PI双染色。
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼上的战友，你能告诉我，我判断的2.3是不是凋亡吗？
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
吖啶橙能透过细胞膜而嵌入DNA，使之呈现绿色。溴化乙锭仅能透过破损的细胞膜而嵌入DNA使之呈橘红色，且橘红色亮度胜过吖啶橙的绿色。凋亡的细胞由于染色质高度浓缩使其细胞核着色不均匀，而未凋亡的细胞则呈正常结构，着色均匀一致，在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞，核染色质显现绿色并呈固缩状或片段状；非凋亡的死亡细胞, 核染色质着橘红色并呈正常结构；晚期凋亡细胞，核染色质着橘红色并呈固缩状或片段状。
原理是如此，可是实际判定时要定好自己的标准，有的细胞并不适合此法。祝实验顺利。
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在荧光显微镜下只能是分别用蓝光或绿光激发观察，但是由于滤光片的缘故，EB的红光可部分串色，因此用蓝光激发时可观察到绿色和橙色；你也可以用激光共聚焦显微镜观察，它可以分通道显示绿光和红光，同时还可以得到两个通道的叠加的图像，很清晰。
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any333[使用道具]
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发表于 2012-8-7 11:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有就是用软件可以将蓝光激发后得到的图片与绿光激发的红光的图片叠加，可得到完整的AO/EB图像
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