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标题:[求助]铺胶原的24孔板

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1
 

[求助]铺胶原的24孔板

我想用铺胶原的24孔板。
有哪位兄弟姐妹做肝细胞原代培养的用过铺胶原的24孔板,我知道那里能买到的请告诉我,在下不胜感激!!
有做肝细胞原代培养的朋友,能说说你们都是在什么上培养的吗?用24孔板的都用什么厂家的好点?直接用贴壁效果怎么样?
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misswu61[使用道具]
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2
 

我们一般用corning的培养板,不需要铺胶原,新板表面已经经过处理,如果你的原代细胞贴壁不良还是考虑一下调整消化时间,corning的培养板没有用胶原处理过的,不过有经过多聚赖氨酸处理过的,你一定要用胶原处理的,可以自己买一些胶原自己铺,也不算太麻烦。
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zranqi_1[使用道具]
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3
 

millipore也有啊,从前用过也挺好用的,最近听说是改良过的.不知是否如他们所说,不过其信誉还是不错的.自己看看先cuturl('http://www.millipore.com/markets/bioscience.nsf/docs/millicell24')
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yapuyapu[使用道具]
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4
 

铺好胶原的板可能没有,你可以自己铺,costar的培养板不错.用胶原蛋白自己铺就行了.最好铺上胶原,这样有利于肝细胞的贴壁.
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summerxx[使用道具]
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5
 

有賣鋪好膠原的plate, BD Falcon有賣.
不過那東西很貴, 而且有保存期限.
大部分都是自己鋪膠原的, 很簡單.
會買預先鋪好的, 通常是生技公司,
他們是業務太忙沒空自己鋪才會買現成的,
在學校裡通常沒人買這種東西的.
養肝細胞一定要鋪Collagen type I才會長得好,
用哪家plate倒沒那麼大的影響,
只要是名牌的用起來都差不多.
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junhun[使用道具]
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6
 
用鼠尾胶原即可,其他人处死老鼠时(大白鼠)你就去要几个,制备过程也不复杂,但要注意无菌操作。经济实惠,效果也不错!顺便提醒你,做肝原代细胞培养时因为要超速离心多次,较费时,所以超净台里面的培养液不要打开过早,或者要及时加盖,否则PH值会变化很大,影响结果。此外,要选择年龄较青的老鼠,老的老鼠分离出的细胞少,活力差。
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7
 
谢谢,我也试过了,但是效果没有差别,而且鼠尾胶原无菌操作很是不好保证阿!
哪位仁兄能告诉我鼠尾胶原的无菌方法?
不胜感激!
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baidukk[使用道具]
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8
 
取下鼠尾在酒精里泡,剪断成1-2厘米长,在超净台抽出尾腱,剪碎,放入高压灭菌好的醋酸里,泡48小时,然后离心取上清。这样就能保证无菌了
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