小中大有点糊涂了。我理解你的意思是把组织切为小片后再养,然后看组织片里的细胞是不是活的。
至于怎么获得足够薄的无菌的组织片,不明白。
1.把组织片放瓶子里很容易飘起来,操作要点建议看看组织块培养的方法。对小块皮肤组织是像摆围棋样吧组织块摆在瓶底,先不加培养基,在孵箱里先放一下,再轻缓的加培养基,量稍微盖过组织块,所有的操作都要轻缓不可晃荡倾斜。
2.你还要消化?是指你培养了一段时间后的组织块再拿出来消化吗?然后看是否有活细胞?
这样的话对于肝脏组织,胶原酶是不错的选择,但比较贵。胶原酶对细胞损伤相对小。可以参照园子里的肝细胞原代培养。胰酶显然是不好掌握的。
3.你既然是看组织块培养后有没有活的细胞,为什么非要它贴着呢?飘着跟贴着不是差不多的生长环境吗?
除非你的意思是要贴着让细胞爬出来。消化贴壁的细胞就是常规操作了。
况且从组织块里爬出的细胞的类型并不一定是你想要的。