小中大[求助]成纤维细胞原代培养
我本是在临床看病的小大夫，一个不小心上了养细胞的“贼船”，培养巩膜原代成纤维细胞，都说成纤维细胞好养，可我就是养不出来，和导师说，导师立刻把眼睛一瞪：“这样的细胞你都养不出？！”可我就是养不出来，每天叭叭得看啊看，找啊找，都要紧张出心脏病了，也没有污染（实验室的老师们都说没有），就是不见细胞从组织块里爬出，真对不起那些买回来就被处死了的动物。
我总结了一下失败的教训，准备过两天重头再来，可是时间不等人啊，我还能有几个“重头再来”？请各位高手帮忙分析下，挽救我于心脏病的边缘，多谢了啊！
1.取标本时失误。分离时刮的太狠，把本来就不多的含细胞成分的组织刮没了？
2.组织块剪的太大，铺的很不均匀。下次准备用刀切。
3.培养液（DMEM+20%FCS)PH值有问题？不过肉眼看着颜色是正常的。
4.血清不新鲜？
5.操作不规范，有污染？
主要就想到这些。
下面是我长不出细胞的培养组织块生长情况，还请各位XDJM帮忙分析！
