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标题:[求助]细胞不明原因死亡,求分析原因

any333[使用道具]
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[求助]细胞不明原因死亡,求分析原因


我的成纤维细胞不明原因死亡,,细胞先是小面积出现变小变圆变亮,然后逐渐扩大,传代后全部变成逗点状,不漂,已排除污染,并且培养液也没有换过。不知哪位可帮助分析一下原因。
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is2011[使用道具]
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你的培养液没有换过?成纤维细胞我没养过,但根据一般的经验,如果细胞没有得到及时的换液与补充生长因子等营养物质的话是更定长不好的啊。或者你一开始给予的营养物质就是不足的。
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caihong[使用道具]
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成纤维细胞不像癌细胞,基本上最好每天换培养液,及时补充营养同时吸去坏死细胞对生长细胞的影响。
另外,补充的血清如果在灭活的时候出现问题,比如底部有沉淀,有漂浮物,加入到母液培养基中就可能造成细胞生长状态不好,甚至出现你上面的情况。
因为我自己培养的就是人表皮角质细胞。
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ALALA[使用道具]
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我也遇到过同样的情况
感觉成纤维细胞比较难养,不知是不是对血清成分比较挑剔。
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any333[使用道具]
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我所培养的是细胞株,六月份开始养气,直到出现问题前,状态一直很好,我对我的培养技术绝对放心。我后来重新换过所有的培养液,重新复苏细胞,复苏后细胞生长很快,但是传一两代后,而且,细胞一直在生长较快的情况下突然死亡,我同时复苏的九月份和十二月份冻存不同代数的细胞同时出现这种情况。培养液使用10%胎牛血清,营养足够,细胞死亡时并没有铺满。
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mamamiya[使用道具]
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你在处理细胞的时候是不是把培养瓶竖起来的?贴壁细胞对这很敏感的,我有一次细胞突然不明原因死亡,为了找原因我做过一个伤害实验,把培养瓶平躺在超净台里照紫外1.5小时没事(紫外穿透力很差),放在4摄氏度冰箱过夜没事(只影响生长速度),-20摄氏度过夜只有很少死亡(底部结冰),我就觉得奇怪,细胞咋这么贱?不死!然后我又做了一个实验,把一个培养瓶竖着,一个躺着(就放在桌子上),结果半个小时的时间那个竖着的培养瓶里的细胞死光光。我估计先前几个实验细胞不死是因为有培养液的保护。我养的是杂交瘤细胞,属于半贴壁细胞(一吹就下来)。
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any333[使用道具]
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没有将培养瓶竖起,而且,我的种在皿里的,瓶里的,12孔、96孔板里的都同时死亡。
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any333[使用道具]
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any333[使用道具]
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any333[使用道具]
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