[求助]pc12细胞的分化问题

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标题:[求助]pc12细胞的分化问题

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

PC12细胞有两种：未分化型和分化型。
我做一种神经营养因子的功能的测定,是不是用未分化的pc12细胞?这里的未分化和分化各是什么意思?是指它的恶性程度吗?我是新手,请教各位?

dog002[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

分化的是有突起的就想神经原的样子
未分化的就是一个小圆点
你做神经营养的应该用分化的

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我觉的应该用未分化的pc12细胞吗?因为蛋白的预期的目的是要使pc12细胞向神经方向分化,如果我用了分化的pc12细胞,最后的定论就不好下了,到底是不是我蛋白的作用促使它长起突起了还是它本身的突起呢?请教各位高手,我分析的对吗??

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发表于 2012-8-13 11:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用分化的是因为它有分化的趋势
加入NGF后可以刺激生长,就象神经原细胞

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

pc12细胞分化是目前比较成熟的研究NGF对于神经元生长的模型。但是对于pc12细胞分化的指标判断一般是其突起长度大于胞体直径的二倍，作为判断标准，一般用胎牛和马血清培养时也会有很短的突起，但不能说此时细胞已经分化，可以登陆cuturl('www.atcc.com')查看pc12 是什么状态。

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养条件:ＰＣ12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于ＣＯ2培养箱(37℃,95%空气5%ＣＯ2),培养基选用ＤＭＥＭ(ｐＨ7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。
分化前:ＰＣ12细胞在培养基中多呈圆形,直径15～20μｍ,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。
分化后:加入ＮＧＦ后的24ｈ内细胞停止分裂,长出似交感神经元样的突起;第4～14ｄ,细胞体积增大,突起增多并增长,形成网络,数周后,突起可长达500～1000μｍ(B图)。
NGF可促进PC12细胞向类似交感神经元样的形态分化,最终导致PC12细胞在生理、生化方面都具有神经元样的功能

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=4940652&sty=3&keywords=PC12+%B7%D6%BB%AF')
有细胞照片

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问上面的高手:
我现在正在做一个基因表达蛋白的功能,文献上说它能促进神经突起和轴突的生长,我的细胞模型是pc12细胞,我买的是未分化的 pc12细胞,目的是想在加入我的目的蛋白后,它能使pc12向神经分化长出突起,我们的想法对吗?

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 flower-201 于 2012-8-13 11:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
请问上面的高手:
我现在正在做一个基因表达蛋白的功能,文献上说它能促进神经突起和轴突的生长,我的细胞模型是pc12细胞,我买的是未分化的 pc12细胞,目的是想在加入我的目的蛋白后,它能使pc12向神经分化长出突起,我们 ...

我觉得你的实验可以分两步：（1）在未分化的PC12中，加入你所要用的蛋白，看是否可以促进细胞的分化；（2）在已经分化的PC12细胞中（比如经NGF诱导），加入目的蛋白，看是否可以促经其突起生长；

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-8-13 11:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果做神经生长模型是不是必须选择分化的细胞，加入我的目的蛋白质后，他会长出突起，但是分化的细胞本来就有突起，假如我的蛋白后，并不能说明问题。长出的突起并不能说明是我的蛋白的功能．我好困惑，我的蛋白具有促使神经突其生长的功能，但文献报道没有促神经分化的功能。我到底用哪种分化还是未分化的呢？我是新手，对这方面的知识了解不多！！能否给予我清楚的解释！

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