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标题:[求助]关于细胞株运输

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发表于 2012-8-13 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于细胞株运输


我准备去中科院上海生命科学院取细胞株，由于单位离得很近，来回路程大约有30分钟，我现在想用装有干冰的保温瓶过去取，然后马上复苏，不知行不行啊？请各位战友帮忙一下了，谢谢！
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发表于 2012-8-13 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以的，但是取活细胞不是更好吗？
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发表于 2012-8-13 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 one 的帖子

谢谢你！他们只有冻存的，所以只有自己复苏了，呵呵。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2012-8-13 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问下：
如果是活细胞，如何短途运输呢，如何控制无菌呢？由于意外断电，我常常需要步行20分钟将细胞转移到另一个实验室，不知如何控制无菌？而将不利培养因素减少到最低呢？
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greenbee[使用道具]
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发表于 2012-8-13 14:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我前一阵刚去北京那回一株活的细胞，我将挑选的生长状态良好的细胞装满培养基，将瓶口用酒精棉球擦拭２遍，将瓶盖拧紧，酒精消毒后用封口膜封闭，整个瓶子外表面喷上酒精，用塑料手套包裹后，竖力贴身放置（或者比较温暖的地方），运输途中尽量避免剧烈震荡（避免培养基与瓶口接触）．细胞取回后，半量换液（保留吸出的大部分的培养基，以备以后半量换液用）．我的细胞现在长得不错．
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发表于 2012-8-13 14:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，原来这样就可以保证无菌了，好的，下次尝试一下，谢谢
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plaa[使用道具]
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发表于 2012-8-13 14:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我建议你不要拿冻存的细胞！
细胞复苏要快速溶解，一般从液氮罐中取出立即置于38度左右温水中快速摇动，溶解过程控制在一分钟之内最好。如果你放到保温瓶30分钟恐怕复苏的存活率很低。建议你买活的细胞！
活细胞的运输方法其实很简单，我曾经拿了一瓶细胞在路上耽搁了一个多小时回来细胞状态仍然很好。
具体做法是：1 将该瓶细胞装满培养基，这样做的目的是让所有细胞都始终有营养供给。2 用酒精擦拭培养瓶，瓶口用封口膜包好。3将培养瓶竖放到干净的塑料手套或纸带中。4 细胞取回后，半量换液。

如果是由于意外断电，需要步行20分钟将细胞转移到另一个实验室，就没条件将培养瓶灌满培养基，建议你将瓶口用封口膜包好，瓶身外面用酒精擦拭后平放到铝饭盒（用来装物品消毒的，细胞实验室常见），水平端到目的地就没问题！不用过于担心，只要瓶口封好了一般不会污染；细胞置于培养箱外20分钟问题不大。
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发表于 2012-8-13 14:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

半量换液的目的是什么？为什么还要保留吸出的液再用，会不会增加污染的机会？
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发表于 2012-8-13 14:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还是有个疑问，在保证细胞瓶水平时，步行时培养液肯定会冲击到瓶口，拿到培养箱时，需要在无菌台中将瓶口在烤烤吗？如果不烤，去封口膜时，能直接放到培养箱里吗？
我遇到两次断电，我是用的保鲜袋，没有见到那种细菌的明显的污染，但是多了很多的小黑点，不知道是支原体还是黑焦虫
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-8-13 14:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我建议拿活的细胞, 运输时只要将细胞瓶装满培养液, 细胞瓶顶部留少许空隙即可,放在你的口袋里都可以, 贴身放就 更好了, 用此方法细胞可以在培养 箱外存活1天至少.

至于冻存的细胞我觉得可以将细胞从液氮中取出,先行将之快速解冻,在30分钟内将细胞复苏就好了, 不知道这样能不能帮到1楼
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