3.原代培养也叫初代培养,是从供体获取组织后的首次培养。优点是:组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分,生物条件稳定的情况下(年龄,性别),在一定程度能反映体内状态。
原代培养细胞的改变,主要是表型上的改变,不一定为体细胞突变。从理论上说,人们有可能创造出一种条件,使原代培养的细胞恢复体内时的功能,因此原代培养细胞是研究基因表达的理想系统。采用原代培养细胞做实验,如药物测试等效果很好,原代培养也是建立各种细胞系的(株)的必经阶段。
但原代培养的细胞是由多种细胞组成的,即使培养的是比较单一类型的细胞,如上皮和成纤维细胞,也存在异质性,在分析细胞生物学特性时仍有一定的困难。
传代培养就是因为细胞的生长的接触抑制(贴壁的),当长满物理空间时进行分离,以继续培养。
觉得你的问法有点拗口。
如果你的工作是从猪身上取了脂肪前体细胞的话,你的实验过程当然包括了---原代培养。
按你的话推测,你好像是准备用你传了几代的细胞做相关实验。但你的实验的名字不是--原代培养吧。
原代培养只是你的实验的一部分。
这样的话,使用哪一代的细胞做实验就看你的实验设计了。细胞在培养传代过程中或多或少的会改变的。一方面要对原代的细胞纯化(方法多样),一方面要选择合适的时机施加实验干预:比如做干细胞的诱导,有的是选第3/4代的;做干细胞鉴定要尽量纯化。
看你的实验要求了。
而脂肪前体细胞有现成的细胞系的----3T3-L1。你用它来做,你的实验过程就不包含什么原代培养了。
2.鉴定方式文献应该有的!
1.不知道你是怎么分离,你的培养天条件所以不好回答。
因为我的实验也是关于脂肪的,但我要的是脂肪间质细胞,相信你对此也有了解。我的分离方法就是普通的离心,原理是含有脂滴的成熟细胞和含有部分脂滴的脂肪前体细胞密度小会浮在上层。好像,要获得脂肪前体细胞是要密度梯度离心吧。
我一次实验,偶然获得少许和你的照片的类似的细胞---在我的上次发言中说了。但我没照也没做脂肪染色。