小中大我现在配DMEM，配制过程中有个问题向大家请教。请多多指点。
我用的是Sigma的DMEM，按说明就补加3.7gNaHCO3但是补加后，PH值升的挺高（有８点多），加盐酸调回后使用。在使用过程中发现PH值波动较大，所以想加HEPES，但是又看到说HEPES缓冲液与低水平的碳酸氢钠(0.34g/L)共用（cuturl('http://www.biox.cn/content/20050511/12854.htm')），这是不是说如果用HEPES碳酸氢钠就不能大于0.34g/L？
还有在配制DMEM过程中加入的碳酸氢钠作用是什么？是仅为了缓冲，是否还涉及渗透压的问题？如果仅为了缓冲，那为碳酸氢钠的量就不重要了，要是涉及渗透压的问题，那就必须加入足够量的碳酸氢钠了，那样的话是否就意味我不能加入ＨＥＰＥＳ了？
矛盾！请帮忙：）多谢．
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谈谈个人看法，供参考：
“加3.7gNaHCO3后，PH值升的挺高（有８点多），加盐酸调回后使用。在使用过程中发现PH值波动较大”。加NaHCO3是为了与培养葙中的CO2形成碳酸缓冲对，由于空气中的CO2浓度很低，所以pH偏高，如果在培养葙中会自动平衡到7.2-7.4。“加盐酸调回”使缓冲对失缓冲，所以“PH值波动较大”。
HEPES是有机缓冲液，自身含有H+和OH-缓冲对，所以可以与其它缓冲剂同时应用。
在配制DMEM过程中加入的碳酸氢钠作用是仅为了缓冲，不涉及渗透压的问题，此微量的渗透压可忽略不计。
