小中大[求助]白细胞分离的太少，我该怎么办？
听说小鼠大量采血一般采用“摘眼球”的方法，最近我做了一部分，发现最多才刚1ml左右，大多是0.5-0.8ml，然后我去离心分离白细胞，低渗破红、洗涤、离心后发现离心管里只有很少的WBC沉淀及一些没完全破裂的RBC，我想用这样的样本去提RNA估计很难吧？
我该怎么办？？是不是我的方法不对？
下面是我的具体方法：
1：准备好抗凝管（一次性3ml抗凝管）。固定小鼠（20g左右）。摘眼球，抗凝管接流出的血液，旋转摇匀，1000～1500rpm离心5min，分离血浆，200µl/支，－20℃保存；
2：稀释：加入等量NS，吸管轻吹，混匀；
3：叠加：5ml离心管中加入淋巴细胞分离液1ml，倾斜试管，然后用移液器取稀释血液，沿管壁缓缓叠加于分离液之上，注意保持液体界面清晰。
4：水平离心分离：1000～1500rpm，15min；用小口塑料管轻轻吸取分离液中的单个核细胞层（呈白膜状）充分吸尽，移入另一EP管。（此时若吸取效果不好则继续稍离心1000rpm，15min，去上清，再移入另一EP管。）
5：洗涤：吸出的单个核细胞（用1倍体积的蒸馏水洗1次，45s后，立即再加入1.8%NaCl溶液洗一次。1500rpm10min去上清，然后加入含有RNA保护剂（100μl/管）EP管中，－70℃保存。
请高人指点
衷心谢谢！！
