小中大细胞的微生物污染及其判断：
1 细菌的污染的判断；初期由于抗生素的存在，少量细菌感染细胞生长不受影响，菌量多时，一般培养基变浑浊，并有点状的细菌颗粒。将10ml的细胞悬液1000R/MIN离心5分钟，以无菌PBS洗两遍，加入无抗生素的培养基2ml，37度培养箱中培养24小时，就会有阳性结果。
2 真菌的污染及其判断；真菌比细菌大几十倍，对紫外线及一般消毒剂很抵抗。多是酵母菌、霉菌的污染。酵母菌污染时，打开培养皿可以闻到酒或者发酵样的气味。霉菌污染时镜下可以看到丝状或者树枝状的菌丝，可以悬浮或者附着在壁上。多见于湿润环境。
3 支原体的污染剂判断；据报道：目前世界上30％－50％的细胞株已受支原体感染，培养过程中，如果发现细胞碎片较多，需要频繁改善营养环境才能支持长期传代时，应怀疑支原体污染。
判断：我在这里讲一种比较好理解的方法的基本原理：
是用hoechst33258染色，它可以染DNA，由于没有污染的细胞胞外没有DNA，而污染的支原体附着在细胞表面，则可见核外点状或网状荧光，其荧光的密集度与污染程度成正比。除此以外还有PCR法和免疫学法。
图是有的，可惜偶没有扫描仪，无法上传，SORRY。
－－－－参考 科学出版社 《体外培养的原理与技术》。
