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标题:[求助]DMSO溶解

newway[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]DMSO溶解


我做的试验是把药物溶解到DMSO中，最后配成终浓度为1umol/l的母液。
刚开始我以为都是用DMSO溶解，连最后试验需要用的稀释液体也是用DMSO溶解，后来我们寝室的人告诉我DMSO对细胞有毒性，相应的浓度不能超过0.5％，要用培养基稀释。
我觉得她的话有道理，是我没有想到的，但是文献上没有说用培养液稀释到母液的浓度，是不是这是一个很简单的问题，不需要说明啊？
还有今天拿DMSO溶解药物，没有加培养基，竟然没有溶解，有人说过饱和了，我想不出来那里错误了，实在是郁闷。
有对这方面有了解的兄弟姐妹们，有知道的望告知。谢谢。
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生物迷[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用DMSO溶解药物，根据药物溶解度有2种方法：
1.高溶解：用DMSO溶解药物后用培养液（无血清）稀释为工作液，按用量加入培养的细胞中。
2.低溶解：用DMSO溶解药物，使用时直接用微量加样器加入培养的细胞中。
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

“文献上没有说用培养液稀释到母液的浓度，是不是这是一个很简单的问题，不需要说明啊？”

由于DMSO的毒性，用在细胞的终浓度不能太高，我的药也是用DMSO溶的，至于最终的浓度，我们这里要求是不超过0.1%,园子里也有战友说不超过1％即可，我印象中我的药在加入生长液稀释后，DMSO在0.1％左右的时候，有部分固体药物成分析出。故而现在考虑可以适当提高一点DMSO的终浓度助溶。

“还有今天拿DMSO溶解药物，没有加培养基，竟然没有溶解，”

不太明白你说的意思，是脂溶性的药物就可以啊，你看看说明书，一般都要求用DMSO或者乙醇。要是水溶性的用培养液就行了。
溶药的时候，先依据你稀释达到你需要的药物浓度的时候，DMSO必须在控制的浓度范围内所需要的DMSO的量计算一下，用多少DMSO和药物，用纯的DMSO溶解，配成一定浓度的母液，过滤除菌，－20度保存，每次用时取出一部分稀释成你所需要的浓度。其他的东西不要加DMSO。
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.我做了这么多次的MTT，结果发现DMSO终浓度0.4％以下对实验结果影响很小，文献上说不超过1％即可，但要依细胞株而定，如果是自己分离的血管内皮细胞，等达到1％，早都死光了，肿瘤细胞稍好点。
2.建议同时设含DMSO和不含DMSO的阴性对照组。
3.我也碰到过（拿DMSO溶解药物，没有加培养基，竟然没有溶解，）类似的问题，但我加的是PBS。先用DMSO溶解药物，用振荡器多振荡一会，一般就溶解了，如果还不溶解，先别紧张，再加PBS或培养基，这回应该没问题了。
祝你成功！！！
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HPLC使者[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.据我们实验室做过的摸索实验,对肿瘤细胞而言,DMSO浓度在0.5%以下对细胞是没什么影响的,没有必要再设置不含DMSO的阴性对照.
2.我的药物也是DMSO溶解的,配好浓度后,如果不溶,我一般是放置水浴中(温度随药物而定,37度应该对大多药物都很安全),一直放着,它总能融的.万一它不溶,还有一个办法就是放超声中超一些时间.呵呵,这个方法肯定有用.但是时间长了对药物会有影响的.
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newway[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可是用过楼上同志得所有方法还是不容！很郁闷！
另外，我现在想配点多糖溶液，怎么都搞不定，希望得到大家得帮助！
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newway[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

问一个很菜的问题，大家提到DMSO对细胞有毒，但冻存液里要求10%DMSO，会有影响吗？我的细胞株刚买的，花了不少银子，，，，，，，希望各位高人指点，，，，，，，，
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DMSO在深低温冷冻后对细胞无明显毒性，它分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻的方法可使细胞内的水分渗透到细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞的损伤。在这里DMSO是作为细胞保护剂的。
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-8-23 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的药是用DMSO溶解的，DMSO 浓度达到0.8％的时候药物才溶解，可是这个时候DMSO从测得的MTT数据上看有明显得影响。请问有没有什么办法可以提高药物的溶解性，又能降低DMSO的浓度。
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newway[使用道具]
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发表于 2012-8-23 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下，使用DMSO溶解的药物，在对培养的细胞进行处理时，选择怎样的阴性对照？
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