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标题:[求助]细胞不干净怎么办？

BUK[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞不干净怎么办？


我养的是293细胞，细胞很脏，瓶地有一些黑色的灰尘一样的东西，可以动，细胞膜上也有，每次细胞传完代后第二天尤其的严重，细胞铺满瓶底后就没了，我怀疑是细胞把他们覆盖了，我把培养基，血清都滤了还是没用，不知道是什么原因？
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HP007[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能是支原体污染了
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windy+++[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1、根据你所说的细胞生长情况，污染只是可能原因之一
2、还可能是血清质量有问题，换用新血清后这种情况可以改善
3、再仔细比对一下你培养液的PH值，这也是影响因素之一
4、最后，祝早日解决问题！
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发表于 2012-8-23 15:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我怀疑是污染了，在培养基里加抗生素换三次液后再换成不含抗生素的，试一试可能改善．
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发表于 2012-8-23 15:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我培养的骨髓细胞也是那样的，培养视野也是很脏，有黑色颗粒很多，但是培养液没有很大的改变，用同一种血清培养其他细胞却很干净，在高倍镜下观察那些黑色颗粒成波浪式运动，细胞增值却不受影响，那是怎么回事？
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果做不郎运动的话，可能是染菌了。但是具体是哪种菌我也不太清楚。细胞增殖不受影响，可能是感染不太严重吧。一般来讲，只要不影响细胞生长就不用管他
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

血清在灭活之后会产生一些黑色颗粒沉淀，我的血清是进口的胎牛血清，也出现了很多这样的黑色沉淀，在细胞扑满瓶底之后，黑色沉淀就很少几乎没有了，漂浮的片样黑色颗粒也有一些，不是染菌了，仔细观察就会发现，和污染有很多不一样的地方。过滤培养基血清只是滤走了细菌，不会滤走这些东西，所以还会有
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

也有可能是真菌污染，每次换液时，用PBS液洗两次，可以考虑用抗真菌药物
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kulee[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是支原体污染,请参见
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=4883945&sty=1&tpg=3&age=0')
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ero11[使用道具]
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发表于 2012-8-23 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在我们实验室各种细胞都有黑点，都不干净，这些小黑点自己不会运动，刚开始也以为是污染，但是细胞生长不受影响。下面是细胞照片。
我用的是TBD的胎牛血清，海科隆的培养基，并且G418筛选，这个细胞要用来做膜片钳，一直做不上，请哪位高手指点一下。


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