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标题:[求助]细胞被污染，怎么办？

hold住[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞被污染，怎么办？


各位，我的细胞好像被污染了，培养基才一天就变成了黄色，而且混浊，镜下看到有小黑点。由于细胞珍贵，麻烦指点一下怎么救回来？
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
首先，我觉得救回来的可能性是非常小了，作好心里准备，看能不能再弄点重新养

如果说办法，对于贴壁的细胞而言，试试用培养基洗几遍，然后在培养基中加入1000U/ml的双抗（或者庆大霉素），第二天观察一下，看有没有转机

双抗对细胞的生长是有影响的，大浓度的双抗不主张在通常培养中使用

最后，我认为找到污染的原因是最关键的，这样以后就可以避免了，我在培养细胞的过程中，操作没有问题，但是总污染，后来才知道是因为在观察细胞的时候总要到远离细胞的地方去（实验室差啊，只有到别人实验室了），在走动过程中，细菌到了瓶口，在下次传代的时候就会污染了，找到原因后，注意避免，我就再没有污染了

因此，真心祝愿你能找到污染的原因，并祝你实验顺利！
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glass[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
算了吧，浪费时间不如复苏或者想点别的办法！
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kulee[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是鼠源细胞，建议注入小鼠腹腔吞噬。3~4天后收集即可。

人源就有困难了。
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是个养细胞的菜鸟,同时复苏了A375,B16,HePH2,BGC,结果挨个被污染了,还不只一次,第一次是细菌,第二次是真菌,郁闷啊!现在技师正在处理所有我用过的台子和培养箱.
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wmp1234[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我建议你换一下液,加之前彻底用D-hank'液洗一下，新加的培养基要加抗生素，祝你好运
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没关系 ，刚开始 都这样 ，注意 枪头 别碰 废液缸 ，我以前污染都是 这样的 。
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hold住[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的人都惧我了，怕我把他们的细胞也染了，看着最近不用的细胞都冻存了，现就我一人在忙，不过让我恐惧的是竟然来了个养细菌的培养箱就在细胞培养箱旁边，烦啊！
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-8-24 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是啊，珍贵细胞被污染是很郁闷是事情，我前些天的细胞就是被污染了的，不过是微生物，我就先用PBS洗了几遍，然后又用培养基洗了几次，挽救回来了，可后面长势不如之前了。我觉得你得查查是被什么污染了，然后再打算怎么办，我想还是有可能挽救的。别灰心。
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发表于 2012-8-24 12:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果是悬浮细胞，离心洗涤后再加大双抗的量试试。
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