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标题:[求助]细胞被霉菌污染!

蒲公英[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞被霉菌污染!

我在实验室搬家之后开始复苏细胞,细胞在复苏第48小时出现肉眼可见的霉菌菌落,细胞是在27度孵箱生长,由于是新配置的培养基加有青链及两性霉素没有丢弃培养基.第二次重新复苏细胞,结果在第48小时又看见了大小相仿的霉菌菌落.听师兄说这种情况可能是细胞株污染.我想请问各位养细胞大侠:这种情况是不是就是我师兄所说那样,还是别的原因引起.我下一步该如何做了?先谢谢了!
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果污染不太严重,加5-6滴佛康唑,连加三天,看是否好转.
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

先取一点培养基培养看看培养基有没有污染，如果没有污染再考虑细胞的问题。

可以用10倍浓度的抗生素冲洗细胞，再充分润洗后用1倍抗生素培养，也可考虑梯度稀释后接种到96孔板中取没有污染的。
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发表于 2012-8-24 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

会不会培养箱里有霉菌？我们实验室曾经出现过霉菌污染，后来发现是培养箱的问题
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

先取一点培养基培养看看培养基有没有污染，然后再定其他。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

其实，遇到这种情况，我们一般是不去做任何补救的，没用．
把培养箱用苯酚熏蒸，酒精擦拭．
一切培养用的东西重配，重新灭菌．
也许，这比你费劲心思去找问题更省一些力气
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主，小弟最近也出现了与你同样的问题，郁闷呀，不知怎样才能避免．
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发表于 2012-8-24 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我今年夏天也出现同样的问题，最后不得不买了一瓶氟康唑氯化钠注射液，滤后分装为1ml ,有真菌污染是加300-400ml，每次换液时都加，一周内真菌不见了 。没污染时，用50-100ml，防止污染。没办法的办法啊！很管用的。祝你好运！
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我佛慈悲[使用道具]
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发表于 2012-8-24 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般加抗真菌或细菌药没有多大效果,反而会诱导出耐药株.如果还有冻存的细胞最好重新启活,一切用具重新消毒,培养液换新,操作间彻底消毒,培养箱消毒(污染的细胞不要在放在培养箱里,会传染其他细胞的).加药挽救是没有可用细胞时的办法,我试过,成功率不高,赌一把而已.
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发表于 2012-8-24 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我认为就放弃吧，把你所有的东西都重新灭一下菌。重新培养新的
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