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标题:[求助]MTT细胞密度--10000是怎样得来的?

orangecake[使用道具]
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[求助]MTT细胞密度--10000是怎样得来的?


如题,为什么不是100000或其他?请教站友。谢谢!
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baidukk[使用道具]
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用血球计数板计数得到的~
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TAT[使用道具]
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是经验值?我们也用10E5
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lixi559[使用道具]
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所用的细胞不同密度就不一样的,我的就只能用到10000
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u234[使用道具]
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个人经验,并且感觉还可以,就是你要摸清楚您的细胞是不是和您所参考的文献细胞具有相同的体积大小,代谢功能等,因为实验就是要摸索的,即使是相同的条件可能都会出不同的结果,至于您问为什么不是100000,我的经验是,细胞数太多会影响您的OD值的,可能会上到一点几到二点几甚至会出现***,这我做过所以我很清楚的,毕竟MTT只是一种粗筛,细胞数多影响您的实验阳性结果,所以10000可以了,足够您检测指标了,有时10E3就可以了!
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10000仅是一个通用数值,现有的教科书上大部分是这个数值,并不适用于所有细胞。做mtt时细胞数目过多,过少都会影响结果。据个人经验,不同的细胞应根据其细胞大小(直径),增值速度,还有就是你需要干预或观察的时间来确定,最好能在做MTT前做一次孔板培养大体观察一下,以便确定接种细胞数目,这样就有备无患了,在你做MTT时能控制孔内细胞数目,不会因细胞过多或过少影响OD值。
偶初进临床时老板曾说过 “做事要有悟性,别人的意见只能是一个参考”。
个人拙见,仅供参考。
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summerxx[使用道具]
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不同厂家有不同类型的血球计数板,但每种计数板充满液体并盖上玻片总容积是定了的,每个大方格体积也就定了,大约是0.1微升,比如每大方格计数100,那么细胞密度即为100*10000/mL。
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glass[使用道具]
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一般都是在96孔板里做的。0.1ml的细胞就是10000个。
所以觉得这个数值还不错!经验吧,个人觉得。
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shenkunjie[使用道具]
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我做的MTT开始参考文献报导,用的是80000个/孔,可是结果就是和文献不同,后来听人介绍改为10000,呵呵!!一把成!
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gogo[使用道具]
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是需要摸索和实验验证的。
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