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标题:[求助]关于过滤器的疑问

superboy[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于过滤器的疑问

由于实验室没有蔡氏滤器，在配制RPMI 1640时只好用美国MILLIPORE公司生产的那种小的一次性过滤器，是0.22um的那种。问别人一个过滤器能过滤多少体积的培养液，有的说只要别堵着了就能用，还有的说只要膜不破就可以。还有的说一次只能过40——50ml。没办法只好自己摸索着干，再滤的过程当中，其中一个我过滤了270ml，还有一个是180ml。1000ml我用了5个。虽然过滤好了，也分装了，但是心里没底，到底这样过滤能不能用，除菌是否南那个达到目的？肯请用过这种滤器的同志给我点建议，现在心里真是好担心啊，配一次真的不容易。万分着急，在线等。
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你过滤液体不作细菌培养实验么？我们常规都这样的，如果24h肉汤没有浑浊，我们就放心用了，不过我们是用大滤器滤的。
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superboy[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 mickeylin 于 2012-8-25 11:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你过滤液体不作细菌培养实验么？我们常规都这样的，如果24h肉汤没有浑浊，我们就放心用了，不过我们是用大滤器滤的。

我是做细胞培养的。
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

天！你用小滤器滤一千，还不把手累掉了。用50ml的注射器也得滤20次。
不过小滤器一般质量都很好，我用到现在用小滤器滤的东西从来没有污染过。
这种滤器和普通滤器一样，只要膜不破，就可以保证无菌，滤的时候可以拿充满空气的注射器检验，完好的滤器不能完全打下去，会有明显的阻力。现对于用买的滤膜自己装得滤器，这种滤器更不容易堵，尤其是滤1640这样没有多少大块杂质的液体。
不过真堵了就当然不能用了，你都推不动注射器，还怎么滤。
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yysr238[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
因为一般实验室2种滤器都有的，所以确实很少使用小的一次性滤器来过滤1000ml培液的。自己认为第一它和蔡氏滤器的使用原则是一样的，就是原则上滤膜没有出现破损，就可以使用并达到过滤除菌的目的；第二常规你应该取培液少量放入37C培箱24－72h作无菌实验，中间如果没有出现浑浊现象，理论上你的培液就过滤除菌成功了。建议你们实验室还是买个大滤器吧！没有多少money的，而且长远使用要比一次性滤器便宜多了，方便又实惠，为什么不用呢？
Good luck!
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

只要感觉还能推动就可以，但不要使劲推，以免把膜推破
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superboy[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位群友了，我再滤的时候没有感觉到推不动的现象，就是稍微的用下力，但愿能用吧。刚才我到这个公司的网站上看了，说可以滤200～250ml吧。我想我的培养液应该可以用的吧。明天试试看怎么样。
我想问一下群友，作无菌实验时，把瓶盖稍微的拧松些吗，还是拧紧？
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发表于 2012-8-25 11:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

打空气要比推液体阻力明显，我滤水的时候就感觉一点劲没用，我还以为滤器坏了呢。
要做有菌实验观察培养液是否污染，只要将率好的液体加到无菌的培养瓶和培养皿里，盖拧松，如果有菌的话一般24小时之内就能观察到。
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superboy[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

今天从垃圾桶里找出昨天用的过滤器用针头打空气试了一下，发现每一个都有阻力，阻力非常明显，这是不是说明过滤器的膜没有损坏呢？
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yychen[使用道具]
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发表于 2012-8-25 11:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做个无菌实验就知道液体能不能用了
我们的做法是
在安全柜内吸取3-5ml液体与一无菌试管中
塞上无菌胶塞
24小时培养后观察是否浑浊
要是液体清亮就没问题！
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