小中大我给出如下几点建议：
1。根据细胞数决定所加trypsin的多少。一般trypsin都是用1%。而6cm皿一般长满要有1×107个细胞（根据不同细胞会有所变化），所以一般加1，000ul～1，500ul trypsin solution。如此量的细胞加如此量的trypsin，一般digest 5min左右即可。
2。如果不行，用timer计时。先计时4min，从co2 incubater中拿出，置显微镜先看看，如果不行，再放进去计时若干分钟(根据你前4分钟）的情况而定。另外，我所说的4分钟是根据第一条的条件说的，请不要误会。
1。吹的时候尽量贴近皿底。
2。吹的时候不要太猛，舒缓一些。
3。吹的时候枪头内的细胞混悬液不要放干，以致吹出泡沫，要留有一些，再从倾斜的皿底吸出一些细胞混悬液，再在皿底吹细胞。
4。您提到的泡沫跟血清是否有关，我想答案是肯定的，应该有关。但我想关系不是太大，因为我在吹细胞时没有吹出很多的泡沫，这种原因我想人为可以避免。
以上建议仅供参考，如有疑问我们再行讨论。
