[求助]细胞真菌感染

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标题:[求助]细胞真菌感染

阿k[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位养细胞的高手，我养的小鼠的黑色素瘤细胞，前几天长势还好，在我传代后，细胞突然真菌感染，培养瓶壁上可见小菌丝，并且我的细胞特别宝贵，刚刚买的，
各位大侠，有没有好的办法，帮帮忙！
还有，无菌室一般多长时间消毒一次，怎样做最好，我的培养箱是内置紫外灯的那种，需要每周紫外消毒吗？培养箱内有分隔，紫外照射后，能彻底消毒吗？有没有更好的办法，谢谢。

ero11[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

只好试用大扶康或伊曲康唑。都是抗真菌的抗生素。普外科或骨髓移植应该有。

Ao7[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:05 资料个人空间短消息加为好友

小中大

估计你的细胞可能是没救了，无菌室最少一周要打扫一次，我们以前要是真菌污染了，还会用甲醛进行熏蒸消毒，另外我觉得培养箱也没必要一周一次打扫，关键在于水盘里的水要干净，要高盐，原来我们顶多是用84擦拭。祝以后好运！！

tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:05 资料个人空间短消息加为好友

小中大

关键是操作吧

wsll[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我感冒了，把它传染了，现在我最怕的是，培养箱污染，细胞是没救了，持续紫外线消毒能杀死真菌吗？还有，用甲醛消毒时，需要多大的浓度，谢谢。

remenb[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

紫外线对真菌污染一点用都没有，只能针对细菌杀菌有效，不过不要太依赖紫外线，它毕竟只能消毒表面。至于培养箱的消毒建议一个月消毒一次，房间最好能在万级区域中。如果被真菌污染了不要想着能救好它，根本没戏。
唯一的办法就是赶紧用甲醛消毒房间和培养箱，不要再次污染。真菌污染比细菌污染恐怖，我是害怕那东西。不过关键还是培养过程中要细心，操作要规范。

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发表于 2012-8-27 16:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

甲醛消毒需要多大浓度啊，谢谢。

remenb[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

甲醛浓度可根据房间的体积来进行计算。好像是每立方18毫升（因为本人已经改行记不清了，具体你可以查书籍），另加入高锰酸钾按2：1的比例配制，不要说你不知道怎么操作啊。
熏蒸时间可以在下午下班前放入，第二天工作前取出再进行通风，或者熏蒸6小时左右。甲醛有一定的毒性，对呼吸道黏膜有很大的刺激性，一定要通风好。另外记住培养箱要处理好，要不你的细胞可能要死光光。

wsll[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我从来没养过细胞，今天找实验室的老师，她告诉我，只要放在一个器皿里，下面铺一层高锰酸钾，上面只要甲醛淹没就行了，我是在自己实验室做的，所有的步骤都的自己摸索着来，所有的消毒都得自己弄，我真的不知怎么配。我把培养箱擦了三遍，消毒水、酒精和清水各一遍，甲醛熏蒸过，就可以直接养细胞了吧，我都快被呛死了，真菌的生命力到底有多强，我真是怕它了，还需要什么处理，非常感谢。

remenb[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

真菌的孢子很难杀死，唯一的办法就是甲醛熏蒸法。熏蒸完成后把培养箱的CO2浓度、温度、湿度调解好后不要放细胞，空运转稳定一夜即可进行培养了。按照deji朋友那种操作确实很认真，我都没有这样认真过。甲醛刺激性是很大，如果不着急培养细胞，就让气味消失的差不多再进入房间。