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标题:[求助]MTT法的OD570值为0.08左右，正常么？

兔唇[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]MTT法的OD570值为0.08左右，正常么？


我做的肝细胞原代培养，测试重金属毒性对细胞的存活率的影响！为什么每个孔的OD570值都在0.08左右，是不是太小了点，正常么！
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

0.08肯定不行吧，太小了，误差范围内，无大意义吧
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感谢你的回答，但是统计出来的数据处理组和对照组之间还是有显著的差异的！！P<0.01,是不是做原代的细胞的增殖活力都不是很高！我用的是无血清培养液！数据可用么！是不是都必须在0.7-1.2之间才有线性！！
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

太小啦，一般不加什么得培养孔也在0..04-0.05左右。
你的问题可能在于：
1.你得铺板浓度小啦，细胞少。
2.在你吸出液体是将细胞吸出去啦。不知道你的操作过程如何。
3.如果你在加入MTT后或裂解或DMSO，在检测前应该略显蓝色或紫色，不然黄色得话肯定是MTT没有反应多少。
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的培养孔什么都不加都在0.04左右，所以你的值肯定不行，怎么会那么小，不过你的培养板倒是不错呀。
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

跟接种量有关吧，我用原代细胞做的一般长了2天OD550都在0.5以上
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junhun[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个结果应该与你吸出96孔板内液体的操作过程很有关系
文献中有用吸出的,有用快速翻板法的

这两种吸出96孔板内液体的方法我都用过,
根据实验结果,个人认为还是用小注射器小心的从上到下吸出液体比较好
翻板法有时候会把空内的结晶甩出,会影响实验结果
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你设的对照孔和空白孔的OD值又各是多少呢？如果对照组在1.0以上，空白组比你测得那个数据小，那说明你的细胞全死了吧，是不是重金属量太高了
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兔唇[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我设置的对照孔的值也是0.09左右，处理组稍微小一点，0.08左右，有些组经过T-检验还是显示有显著性的，空白孔不加细胞的在0.045左右，这样的结果怎么解释？求助各位了！
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-8-27 16:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想空白孔（不加任何东西）的OD值也不会比它小，不太准确。
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