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肯定要对照组,而且是每天的都要对照组,也就是说,24和48小时的对照组都要有的。
做流式的细胞要大约5X10的5次方,接种的细胞浓度看你原来是多大,如果是5X10的4次方接种的,那大约要100ml的培养瓶2瓶就够了。
因为第一天的细胞(24h)可能还没达到对数生长期,所以接种量要多一些,24小时正常对照要100ml的2瓶,每瓶10ml。药物处理组2瓶肯定不够的,看你的作用浓度定了。
48小时的正常1瓶100ml的够,但处理组的可能不够的。
标本处理:收集细胞后,用PBS洗三次,最后一次过后,用95%的冰酒精固定,细胞要打散,越分散越好,放在4度冰箱里,等第二天的完了一起送就可以了。
建议:为了好做统计,最好做3次重复实验。
我说明白了吗?