小中大（1）大鼠腹腔注射肝素钠3000U,速眠新肌注麻醉，75%酒精消毒颈部一下胸腹部皮毛;
（2）颈动脉放血活杀大鼠，逐层剪开胸廓暴露胸腔，无血清培养液自肺动脉冲洗肺部，切下心肺，留肺去心放入盛有无血清培养液的培养皿中入细胞培养室；
（3）眼科剪剪切外周肺组织成大小约1立方毫米的组织块，多次用无血清培养液冲洗，弯头吸管吸取组织块移入50ml培养瓶贴壁，每瓶30块，间距约0.5mm,稍加固化后，加入培养液（Hyclone低糖DMEM,含20%PAA胎牛血清,肝素钠90u/ml,青霉素和链霉素各100u/ml,）2－3ml，不使组织块浮起为度，放入孵箱培养；
（4）因培养60小时见组织块游出的细胞较少，故未及时去除组织块，直到111小时才去除，2天换液一次。
