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标题:[求助]matrigel 胶millicell问题

idea2011[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]matrigel 胶millicell问题


各位战友，国内除了北大生物系外，还有那个公司卖matrigel胶。本来想买北大的，但是他们不邮寄，只能自己去北京买，我在西安，很不方便。另外晶美公司也已经好几年不卖这个胶了(今天电话刚咨询过)，现在马上实验，很着急，望各位给提供一点信息。
还有呢，Millicell这个小室究竟能不能作细胞侵袭实验呀？在细胞培养一书中使用来作细胞迁移实验的，好像没有提到作侵袭实验。本来用transwell小室很好，但是呢因为matrigel胶没有着落，只能想着用millicell了，但是没有做过，周围的同学也没有人做过这个，所以只有请教各位了。
万分焦急。
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Matrigel是BD公司的专利，大约1200元左右5ml，你可以找代理公司，基因公司代理matrigel。
我用的就是millicell，需在膜的上下表面铺上matrigel和fibronectin就可以，fibronectin可以买sigma公司的，大约1500元1ml。
matrigel是在体外构建一个组织内细胞生长的环境，主要成分也与细胞外基质相似。fibronectin在这里起到一个粘合剂的作用它将穿过的细胞粘在膜的方面，最后通过观察被粘住的细胞来评价细胞的侵袭能力。
但我正在预实验，如果你不着急的话，等我实验完了告诉你效果，大约需3天。然后你再决定。
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idea2011[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
真是雪中送炭呀。想请教个问题，我查过millicell产品(PCF)，他们说膜都是包被好的，不需要我们重新包被，请问战友您是怎么作的？能告诉我具体 一点吗？
还有，能告诉我基因公司的电话吗和其他联系方式吗？从网上找到基因公司的电话，但打过去人家说那是私人家庭电话。
买matrigel和fibronectin进货周期大概多久？
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

millicell的膜经过处理后能促进细胞贴壁，但是不能代替细胞外基质，铺matrigel是建造细胞在体内生长的环境，你可以根据自己的实验研究细胞类型来定用不用matrigel。它的订货时间需要4周左右，强调：matrigel的保质期短，约3个月左右。
我只有基因公司沈阳分公司的电话，你可以给总公司发邮件找你所在区域代理的电话。
fibronectin订货需要3周左右。
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idea2011[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您好，能告诉我基因公司总部的邮箱地址或者沈阳公司的电话吗？
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

西安
中国陕北省西安市金花北路169号天彩大厦12楼21203室 (邮编 710032)
电话: (029) 8250-1170 / 8250-1196 / 8250-1187
传真: (029) 8250-1171
电邮: info_xa@genecompany.com

香港
香港柴湾利众街十二号蚬壳工业大厦八楼
电话: (852) 2896-6283
传真: (852) 2515-9371 / 2557-4005
电邮: info@genehk.com

你在好好问一问吧。我也是在网上帮你查的！
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发表于 2012-8-29 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我帮你忙吧:
基因公司国内就是大名鼎鼎的生物通!可以去他的网站,找他的联系方式.
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-8-29 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我现在也在做Matrigel的侵袭性实验。自己的体会是，小室的预铺胶很重要，胶铺不好，细胞就不能穿过至膜的底层。一般胶按1：3稀释，用无血清液。每小室加入稀释的胶50微克。之前的操作均在冰上，所用的板及tip头均先预冷。胶铺好后放在37度温箱里温浴1小时，使胶凝固。就可以做实验了。用之前先用少量的无血清液水化小室。
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 小中大
现在也在做Matrigel的侵袭性实验。自己的体会是，小室的预铺胶很重要，胶铺不好，细胞就不能穿过至膜的底层。一般胶按1：3稀释，用无血清液。每小室加入稀释的胶50微克。之前的操作均在冰上，所用的板及tip头均先预冷。胶铺好后放在37度温箱里温浴1小时，使胶凝固。就可以做实验了。用之前先用少量的无血清液水化小室。

请问您用的是那里的matrigel胶呢？能说的详细一些吗？
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jujuba[使用道具]
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 小中大

请问还可以再具体点吗?冰上操作有哪些步骤?fibronectin什么时候加,怎么用?小室下层的要用趋化因子吗?
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