细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]细胞爬片盖玻片的处理

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 15  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]细胞爬片盖玻片的处理

am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
1

发表于 2012-8-29 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞爬片盖玻片的处理


做细胞爬片盖玻片该如何处理
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
2

发表于 2012-8-29 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

塑料盖玻片就不用处理了呀!美国FISHER公司有,你可以找下当地的代理商!
顶部
zhenxin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76024
精华 0
积分 748
帖子 1216
信誉分 100
可用分 6848
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-31
状态 离线
3

发表于 2012-8-29 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

玻璃盖玻片用之前浸酸处理24小时，洗干净消毒。为了有利于细胞贴壁，可用0.1%gelatin,或鼠尾胶原处理。gelatin有国产的，一般的试剂商店应该可以买到。
顶部
biabiade[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76440
精华 0
积分 388
帖子 435
信誉分 100
可用分 3036
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
4

发表于 2012-8-29 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的处理方法是这样的：
1先用自来水冲洗，
2再泡酸24小时，
3自来水洗掉残留酸后，双蒸水洗3遍，
4再用100％酒精泡过夜
5 37度烘箱烘干，
6烘干后的玻片放培养皿中高压消毒灭菌即可用了。

操作时要一片一片来，不然很容易粘在一起取不下来。
如果想促进细胞贴壁，可以用鼠尾胶原或者多赖处理。
如果经费充裕，可以考虑买fisher的。
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
5

发表于 2012-8-29 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
买来的盖玻片可以直接高压灭菌的，
当然，偶买的是比较贵的那种。
高压后烤干是不会粘在一起的。
对于贴壁好的细胞爬片是不需要经过多聚赖氨酸处理的。
Over
顶部
DDD[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73222
精华 1
积分 587
帖子 790
信誉分 102
可用分 4768
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
6

发表于 2012-8-29 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
当然，偶买的是比较贵的那种。

请问您是在哪个公司定的，货号记得吗？能否给我发邮件告知详细情况呢？molbiowj@yahoo.com.cn谢谢了！
我会提醒斑竹给你加分的，呵呵
顶部
KGZ564[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74472
精华 0
积分 452
帖子 583
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态 离线
7

发表于 2012-8-29 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是肿瘤细胞的爬片，采用了比较偷懒的办法：新的盖玻片（一定是新的）用三蒸水冲洗几次，然后用75％的酒精中浸泡1h，再用三蒸水冲洗，一片一片摊开在烘箱烘干，紫外消毒1h左右就可以用了。做普通的免疫细胞化学染色没问题，我做过很多次了。
不过如果你是做荧光，建议还是按照楼上的战友的做法，好好的泡酸，省得有荧光杂质。
另外，处理好的片子不要再过火了，火焰燃烧残留的物质会影响细胞生长。
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
8

发表于 2012-8-29 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是肿瘤细胞，只需一般的处理就可以了，肿瘤的爬片很容易的。下
1先用自来水冲洗，
2再泡酸24小时，
3自来水洗掉残留酸后，双蒸水洗3遍，
4 37度烘箱烘干，
5烘干后的玻片放培养皿中高压消毒灭菌即可用了
如果是原代培养的最好要用多聚赖胺酸处理了。
但是泡酸前最好用玻璃刀切成圆形的，这样容易爬。
顶部
kewanqi2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76114
精华 2
积分 534
帖子 660
信誉分 104
可用分 4146
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
9

发表于 2012-8-29 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不用那么复杂。
盖玻片一张张分开（避免沾在一起），高压灭菌；
0.25%gelatin coat,37度1小时后吸掉，PBS或灭菌双蒸水洗。
即可
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
10

发表于 2012-8-29 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
塑料盖玻片染色后不能用二甲苯透明，树胶封片，所以还是用玻璃的方便。
顶部
 15  1/2 12››