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标题:[求助]载玻片是不是一定要用多聚赖氨酸浸泡细胞才能贴壁？

987789[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]载玻片是不是一定要用多聚赖氨酸浸泡细胞才能贴壁？


用的话，要泡多久，还要高压吗？/谢谢赐教
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不是，我们这里把它先超声1小时，再烘干后泡酸24小时，再烘干后高压即可，把盖波片放在六孔板里再爬片效果好像好一些。
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不一定非得要用多聚赖氨酸浸泡细胞才能贴壁,根据你培养的细胞类型来看,一般情况下神经细胞类的必须要用多聚赖氨酸浸泡玻片,细胞才能贴壁,而其他类型的细胞则不一定需要,你也可以先用少量血清湿润一下玻片再吸出,也有利于细胞贴壁,要用的话,用多聚赖氨酸浸泡玻片半小时即可,玻片用之前要高压消毒.祝顺利!
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果你是使用24 孔板，或者是48孔的板子，把载玻片预先切好,泡酸过夜,自来水冲洗20遍,去离子水3遍,双蒸水3遍,高压消毒，当然如果是6孔的，就不需用切割了，祝你好运！

cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/3096694')
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还想请教一下,要用多聚赖氨酸泡的话,怎么泡啊,放在哪泡,泡完如何处理,好象不能高压,就那样放无菌台上晾干吗??/望赐教!!!谢谢
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果细胞贴壁比较好，不需要多聚赖氨酸处理的。
如果经过处理了，
处理后用灭菌PBS洗3次，
然后置于超净台中晾干。
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本实验室方法
盖玻片先泡酸，冲洗后高温高压灭菌，烤干，放入孔板，种细胞之前予1％明胶铺板，15min后吸去明胶即可
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orangecake[使用道具]
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发表于 2012-8-29 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用的话，要泡多久，还要高压吗？/谢谢赐教

细胞爬片的玻片当然要经过无菌处理罗！并不是说只有加了多聚赖氨酸才能贴壁，主要看你养的是哪种细胞，比如说骨髓间充质干细胞就是贴壁细胞，但为了在做免疫组化时不脱片，我们还是尽量用多聚赖氨酸处理一下。
我的经验是：
1.95％的酒精浸泡过夜，目的是脱脂。
2.然后用洗洁精洗涤2遍。
3.用双蒸水冲洗干净、泡酸过夜。
4晾干后用干净的白纸包好备用（把一张A4或B5的纸折小，然后把玻片一片一片夹进去），用前再高温高压
5.将盖玻片放入6孔板中，然后将2滴多聚赖氨酸溶液加在盖玻片上，室温晾干过夜
6..紫外灯照射后备用。

这方面的帖子很多，你可以去搜索一下。
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