细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]乱葡萄样絮状碎片(A549)?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]乱葡萄样絮状碎片(A549)?

am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
1
 

[求助]乱葡萄样絮状碎片(A549)?


A549 DMEM 20%fcs 换液后54小时(实验室还养了许多其他细胞,而且长的都很健壮)

现象:
贴壁生长还行,但培养液不太干净,有乱葡萄样絮状碎片(聚集在一起),有的悬浮在培养液中,有的底部与贴壁的细胞好象粘着,像生了根一样,晃动培养液,碎片大多有细胞破裂的痕迹

处理:用PBS反复冲洗2次,较前有所改善
问题:1那些乱葡萄样絮状碎片(聚集在一起)是什么??
2.为什么会出现???
3.大家有什么方法处理???
4.培养液中有时有黑色条状的东西,是什么(操作小心可排除操作过程中掉入,
有朋友说是培养液中本身就有的东西,那么到底是什么)???


先谢谢大家。刚开始养细胞什么也不懂,请大家指教
附图(本来打算不问的,但是想想不能放过一个问题,要不以后还可能发生,)
图为在incubitor外放置2天后的,但那时的现象仍然清楚,贴出来和大家一起学习

图一:a549 10*20 ph2


查看积分策略说明
附件
2012-8-30 12:22
59492120.jpg (20.63 KB)
 
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
2
 
A549 10*4 h


查看积分策略说明
附件
2012-8-30 12:23
32487439.snap.jpg (75.07 KB)
 
顶部
viviwang1987[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77490
精华 0
积分 458
帖子 636
信誉分 100
可用分 3953
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
3
 

是否已经融/汇合了?
顶部
ritou1985[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77664
精华 0
积分 644
帖子 948
信誉分 100
可用分 5596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
4
 

照片看不太清楚……听你说感觉像是污染。你用酒精灯吗?培养液不是过滤了的吗,怎么会有黑色条状的东西呢?应该是操作过程带 进去的,例如酒精灯灼烧吸管的残留物。
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
5
 
1.是不是细胞融/汇合大于她的理论值,她就有可能脱壁胞浆融合破裂,细胞变大(镜下感觉是细胞破裂,但细胞膜好象粘和(附着)在一起,而且细胞膜旁边还有许多沙沙眼眼的颗粒,也许是细胞核,也许是???)这样感觉就像这些乱葡萄样絮状是来自贴在壁上的细胞,
2.促使细胞细胞融合的原因是什么?(自己先去查一下)
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
6
 
1.培养基是我亲自过滤的,应该不是过滤的时候掉进去的。操作时用酒精灯,可能是每次加液时在酒精灯上过火时产生。谢谢,以后会注意。
2.能否指点一下你怀疑污染的原因(一位朋友说是真菌污染,但具体原因根据他没说,看了园子的真菌污染的帖子,感觉不像)??谢谢
顶部
vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
7
 

很抱歉,怪我刚才没讲清楚,我的意思是是否处于confluent state了,不是指cell fusion
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
8
 
首先我是刚养细胞,不太懂
嘿嘿,当时我也没注意我的细胞长的有多少汇合,但是一定大于80%,如果细胞生长达到100%融合以后再叫她们在同一个板子里长,她们接下来会出现什么现象?
顶部
vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
9
 

容易成片脱落
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
10
 
有可能以一点向培养基中悬浮生长,或者脱落在培养基中,接下来细胞生长状态就会变的比较糟糕,破裂死亡?
顶部