小中大支原体污染的检测方法：
支原体污染并不引起细胞外观的明显变化，可利用一系列直接或间接的方法检测支原体。由于支原体种类的多样性，目前还没有一种方便、广谱、特异性高、准确的检测方法。因此，有必要对不同检测方法的灵敏度及局限性有所了解。
1、直接培养法：直接培养法是最敏感的，但也是最耗时的检测方法，大约需28天。从理论上讲，只需一个有活力的支原体就能在培养基上生长。但某些难以培养的支原体限制了直接培养法的应用。理想的直接培养法应采用多功能的培养基，以降低假阴性率。为增加对低滴度和低活力支原体检出率，应采用有氧和无氧两种培养条件及几种传代方式。直接培养法还需要活性支原体作为阳性对照，而且耗时，操作繁琐，因而不适于大多数实验室。
2、间接检测方法：检测支原体污染的间接法包括：PCR、ELISA、电子显微镜检查、DNA探针、DNA荧光染色及生化分析法等。间接法能检测到107／L的滴度。通常情况下，支原体污染后其滴度一般超过109／L，故尽管间接法不敏感，但相对较精确。由于支原体的多样性，表达不同特异性的抗原及酶，为生化及免疫检测法带来技术上的困难。在选择PCR、DNA探针等方法前，应考虑好选择合适的靶序列及引物序列。
3、DNA荧光染色法和直接培养法相结合是支原体检测的金标准。美国、加拿大、日本和欧共体国家生物制药及诊断的监督机构推荐使用这种方法。其基本原理在于利用不同的技术，多次检测，以弥补各种检测技术的缺陷，增加检测结果的可信度。
——摘自”细胞培养污染的途径、危害及预防措施“
李颖健等 肾脏病与透析肾移植杂志 1999年第3期第8卷
