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标题:[求助]关于K562

qqq111[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于K562


我第一次养K562，细胞在培基中悬浮的不多，大多粘连在瓶底，摇动瓶子时也不动，请问这样正常吗？而且，培基中有大量黑色渣滓，好象有些是小虫，可以原地摆动，但是培基颜色正常，不混浊。我用1640+10%FBS，FBS未灭活，有书上说不必灭活，无双抗培养，从复苏到现在培养了7天，第5天传代，新瓶和老瓶中均出现黑渣，但老瓶较严重，细胞的形态不太好，有个别变不规则形状。请各位帮我分析分析原因吧！多谢
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vera+[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不正常,应该基本悬浮,而且K562很好培养,细胞又大又圆又亮。
建议FBS 灭活，可能是你的培养基的问题。当然也不排除你的细胞来源，是不是本来就不好。
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qqq111[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

非常感谢！
我的细胞不是从细胞库买的，是传的别人的，在他们那里复苏后第二天也都贴到瓶底了。如果是细胞来源的问题，那么除了换细胞以外，有没有别的改善的方法呢？
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KGZ564[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

正常啊，K562细胞有悬浮和贴避的两种，你那的可能本身就是贴避细胞。
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

会不会是黑焦虫？
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qqq111[使用道具]
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 小中大

我的K562轻轻一冲就下来了，也不象是贴壁细胞啊
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tuomu45[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养的就是贴壁的～～一冲就下来了～～～
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whitesheep[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

K562细胞呈悬浮生长，也是分层的，状态不好的细胞往往在最上面一层，漂浮在上面，状态好的细胞则靠近瓶底，但是应该不是贴壁，贴壁后细胞形态会发生变化的。培养液中的大量黑色物体，可能是黑焦虫，我们实验室以前也出现过这种情况，但是他的是贴壁细胞可以通过换液把他去除，但是对于悬浮细胞来说不是很好处理掉。你买的血清是哪个公司的，有时候可能是血清有点问题。
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qqq111[使用道具]
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发表于 2012-9-4 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看到有和我一样的情况，我就放心了。我买的血清是国产的，一般吧。我问了一个老师，她让我把瓶子换换试试看，我用离心的方法换液，重新接种到新瓶中，情况有所好转。以前我不加抗生素，现在还是学乖点吧，要加抗生素了！
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whitesheep[使用道具]
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 小中大

k562细胞是半贴壁细胞,它常常住留于细胞壁上,但只要轻轻的吹打,就可悬浮起来!
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