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标题:[求助]关于胰酶

白白的[使用道具]
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[求助]关于胰酶


最近实验室用PBS配胰酶,总是浑浊,过滤也不行。不知什么原因?
另外请教用注射用生理盐水(0.9%氯化钠注射液)是否可以配胰酶?
注射用生理盐水(0.9%氯化钠注射液)是不是含有钙?
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00无名指00[使用道具]
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2
 

你的PBS调PH值了吧?胰酶要在偏碱条件下才溶。我用D-Hanks液溶,PH值调在7.2左右。前段时间我发现我一直用的胰酶不溶了,换了新的胰酶就溶解了,不知道为什么,可能是失效了?有人配胰酶的时候PH值要到8.0。
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owanaka[使用道具]
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用医院用的生理盐水(0.9%氯化钠)应该是可以配胰酶的,其中钙的含量应该很低了.不知道你用的是什么等级的水,当然水的等级越高越好了.我都是用超纯水配PBS,再用它配胰酶.当然用双蒸水也是可以的.由于PBS的PH值为7.2-7.4之间,所以我从来未考虑过PH值的问题.
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pencil菲[使用道具]
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我们实验室从来是用三蒸水配,过滤除菌,也挺好的,
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loli[使用道具]
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我们实验室配制0.25%胰蛋白酶的方法有:
1. 培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解
2.生理盐水配制,要先调ph值7.2到7.4
3.pbs 或是hanks或是D-hanks液配制,调ph值7.2到7.4
0.45微米的一次性滤器过滤除菌,至于作用效果,需要消化一次细胞感觉一下,因为不同厂家的酶不一样,有的作用温和,有的作用剧烈。
胰蛋白酶不溶的原因,我考虑有:
1.过期或是酶已经部分变性
2.溶液ph值不对
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白白的[使用道具]
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谢谢各位。胰酶配置后,用调PH值吗?
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qqq111[使用道具]
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昨天用生理盐水配胰酶,放置冰箱过夜,今天发现有类似的结晶东西在瓶底,各位谁有经验?
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我在用PBS或Hnak's配胰酶后从来都没有调PH值,一样好用,没有什么问题。
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白白的[使用道具]
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谢谢各位的帮助,我昨天应用我新配的胰酶,消化细胞,效果很好。

我是应用注射用生理盐水配置的,放冰箱4度过夜,第二天进行过滤,然后调整ph值,生理盐水的PH不足7,所以过滤好的胰酶还是应该调整PH.
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windy+++[使用道具]
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我用基培配置的胰酶,效果也很好的,没什么问题。
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